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大叶藻种子萌发与幼苗培育种植方法初步研究 　　海草（Seagrasses）是生活于热带和温带海域浅水中的单子叶植物。目前全世界共发现有海草约 12 属 67 种，在中国共分布有 5 科 11 属 21 种海草[1]。大叶藻（Zostera marina L.）作为海草的一个典型代表，生于潮间带和潮下带的浅海中，通常形成广大的群落―海草床。 　　海草能完全生长于沉水环境，有很发达的根状茎，有稳定沉积物、稳定底泥、抵御风浪对近岸底质的侵蚀作用，同时海草的叶片可以捕捉悬浮物，改善水体透明度；海草是第一生产者，通过光合作用，吸收和同化营养物质，净化水质，加速生态系中的营养循环；海草床是高生产力区，是许多海洋动物重要的产卵场、栖息地、隐蔽场所，并是其直接食物来源。海草床巨大的生产力可与红树林相媲美，具有极大的固碳能力，与红树林和珊瑚礁被称为三大典型海洋生态系统。 　　海草种子一般都经历一个休眠期，既有生理、形态休眠又有物理休眠，在外界条件适宜时，种子才开始萌发。本研究旨在探寻切实可行的大规模海草苗种培育方式和栽培方法，本着遵循其自然生理规律原则，尽量模拟自然海域萌发环境开展本实验。所以本实验所选择种子均为已经历其生理形态休眠的自然过程，镜检已可透过种壳见到胚芽的种子为实验对象，选择对其打破休眠有关键作用且人为可控的温度、盐度及幼苗发育基质为实验处理条件。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验用种子 　　实验用种子于2014 年6月采集于河北唐山海域。野外采集大叶藻种子时，只剪下带有成熟种子的生殖枝，运输时置于保温箱中并加冰。在实验室放于2 m3的玻璃钢水槽中暂养，使种子自然脱落，每天换水一次，将散落种子收集于另外水槽中。开始实验时，挑选成熟饱满的种子，先用 75%的酒精溶液浸泡 30 s，无菌海水冲洗3次。 　　由于自然海区采集的大叶藻种子其成熟程度差别很大，作为实验对象的种子均需经过镜检确认其成熟情况，使其相对同步，减少实验误差。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 盐度处理 共设定4个不同盐度的处理，各挑选 100粒消毒后种子，放入200 mL 烧杯中置于试验室，自然光照和水温，进行萌发实验。每天观察种子的萌发状况，统计萌发粒数，以胚根伸出种皮作为种子萌发的标志。每天换水 1 次，实验共进行10 d。 　　盐度处理分别是淡水（0‰）、海淡混合水（14‰）、海水（28‰）、卤水（40‰），以海水处理为对照组（CK）。 　　1.2.2 温度处理 设定3个不同温度处理，各挑选 100粒消毒后种子，放入200 mL 烧杯中，每天换水 1 次，进行萌发实验。每天观察种子的萌发状况，统计萌发粒数，以胚根伸出种皮作为种子萌发的标志。以自然水温和光照处理为对照组（CK）。 　　温度处理分别为：恒温培育箱中设定温度25 ℃，光照；恒温培育箱中设定温度6 ℃，光照；繁育车间内自然水温和光照。 　　1.2.3 幼苗培育基质 实验设4个处理：以可降解的天然材料黄麻网绳为夹苗绳，两端坠以沉子，放于实验水槽；以陶粒为基质物，与种子均匀混合后，放于实验水槽；以海沙为基质物，与种子均匀混合后，放于实验水槽；以黄泥为基质物，与种子均匀混合后，放于实验水槽。 　　每个处理均选用500粒成熟种子，为防止种子与基质物换水时堆积和流散，将其放入用可降解的天然材料黄麻网布做成的网袋中进行实验。培养期间，每天观察幼苗的存活和生长情况，每天换水 1 次，培养实验共70 d。培养结束后，计算种子成活率。 　　2 数据处理及分析 　　（1）萌发率（%）= 萌发的种子数/种子总数×100%； 　　（2）成苗率（%）=初始幼苗数/种子总数×100%； 　　（3）成活率（%）=存活的幼苗数/种子总数×100%； 　　（4）发芽指数（GI）=∑GtDt，其中，Dt 代表发芽日数；Gt 代表与 Dt 对应天数的萌发粒数。 　　采用Excel2007 对数据进行统计分析和绘图。对数据进行 ANOVA 分析，以百分数表示的数据先作平方根反正弦转换，然后再应用方差分析，以 P0.05作为差异显著水平，P0.01为差异极显著。 　　3 实验结果 　　3.1 盐度对大叶藻种子萌发的影响 　　实验结果如表1、图2所示。经10 d快速萌发，对照组（CKD28）种子的萌发率为9%，发芽指数为1.84。 　　其它低盐处理组均对大叶藻种子的萌发有显著影响（P0.05），且随着处理盐度降低，种子萌发率和发芽指数逐渐增高。其中淡水处理组（D0）种子萌发率是CK的7.4倍，发芽指数是 CK 的9.31倍；卤水处理组（D40）种子萌发率是CK的0.22倍，发芽指数是CK的0.31倍。 　　3.2 温度对大叶藻种子萌发的影响 　　实验结果显示，自然水温和光照条件下的萌