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祖师麻药材HPLC指纹图谱的建立 2007年5月 第29卷第5期 中成药 ChineseTr丑ditionalPatentMedicine May2007 Vo】.29No.5 祖师麻药材HPLC指纹图谱的建立 任燕冬,杨武亮,李越峰,宋宏杉,杨世林 (1.江西中医学院,江西南昌330004;2.中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西南昌330006) 关键词:祖师麻;高效液相色谱法;指纹图谱;质量控制 摘要:目的:建立祖师麻药材的高效液相指纹图谱,为祖师麻的鉴别及品质控制提供依据.方法:用liP?HPLC法对不同 来源的祖师麻药材进行指纹图谱研究;色谱柱为DikmaDiamonsilC.84.6舢×200mm,5g,m,柱温为35.C,流速为1.0 mL/min,检测波长为326nm,以乙腈和0.05%的磷酸水溶液进行梯度洗脱.结果:HPLC指纹图谱中祖师麻主要有效成 分均得到很好分离,根据相似度分析处理结果,l8种不同来源的祖师麻药材有l7个共有峰,且相似度较好.结论:本方 法可用于建立祖师麻药材的指纹图谱.且简便,可靠,重现性好. 中图分类号:R94J4.27文献标识码:A文章编号:1001?1528(2007)05-0727-04 由于受产地,气候和生态环境等的影响,中药材 中主要成分差异较大,仅针对其中某一个成分进行 定性定量分析,并不能有效地控制中药材或中成药 的质量.指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或 中成药中所共有的,具有特异性的某类或数类成分 的色谱或光谱的图谱.其特点在于:①通过指纹图 谱的特异性,能有效鉴别样品的真伪或产地;②通 过指纹图谱主要特征峰的含量或比例的制定,能有 效控制样品的质量,确保样品质量的稳定性….祖 师麻是瑞香科植物黄瑞香DaphnegiraldiiNitsche, 陕甘瑞香DaphnetanguticaMaxim或凹叶瑞香Daph? neretusaHemsl的干燥茎皮及根皮.春秋二季采 收剥取,干燥.为民间常用中草药.其主要有效成 分为祖师麻甲素(即瑞香素,Daphnetin),具有镇痛, 镇静,消炎等作用,主要用于风湿痹痛,关节炎,类风 湿性关节炎痛.本实验利用HPLC研究了祖师麻中 香豆素类成分,制定了祖师麻香豆素类成分的 HPLC指纹图谱,为祖师麻的真伪鉴别和质量监控 提供依据. 1仪器与试剂 Aginentl100高效液相色谱仪:四元泵,柱温箱, MVD(和DAD)检测器,Agillentl100色谱工作站;电 子分析天平AE240(十万分之一,瑞士,ME’ITLER? TOLEDOCo.);~Q250超声波清洗器(上海超声波 仪器厂);UV-3000(日本日立公司). 祖师麻甲素(瑞香素Daphnetin,编号:0900— 200102,含量测定用);祖师麻对照药材(批号:1243— 0301),均购于中国药品生物制品检定所.乙腈为 色谱纯(MerkCo.),水为双蒸水,其它试剂均为分 析纯. 祖师麻药材经江西中医学院药用植物学科组鉴 定为合格药材;样品来源见表1. 表1供试品来源 收稿日期:2006-02—12 作者简介:任燕冬(1979一),女,硕士生,主要从事中药质量标准研究工作. 2007年5月 第29卷第5期 中成药May2007 ChineseTraditionalPatentMedicineVo1.29No.5 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:DikmaDiamonsilC184.6 mill×200mill,5m;流动相:A:乙腈,B:磷酸水(pH =3.0),线性梯度见表1;梯度滞后时间:0.38min; 柱温:35℃. 表2梯度洗脱表 2.2溶液制备 2.2.1对照药材和供试品溶液的制备精密称取 对照药材和样品干燥粉末各0.25g:分置50mL量 瓶中,精密加入50%甲醇50mL,称定重量,超声提 取30min,冷却,再称定重量,用50%甲醇补足减失 的重量,摇匀,过0.45m滤膜,各取续滤液作为对 照药材溶液和供试品溶液. 2.2.2对照品(参照物)溶液制备精密称取祖师 麻甲素对照品适量,加甲醇制成每1mL含40g的 溶液,进样前用0.45Ixm滤膜过滤. 2.3精密度,稳定性与重现性实验 2.3.1精密度试验 取一份按2.2.1项下方法制备祖师麻药材供试 品溶液,连续6次进样,进样量1OL,以祖师麻甲 素的保留时间和峰面积为参照,换算出各共有峰的 相对保留时间和相对峰面积,结果表明,各共有峰的 相对保留时间积,结果显示,祖师麻药材制备的供试 品溶液在1d内通过HPLC分析结果稳定,共有峰 相对保留时间和相对峰面积相当一致,相对标准偏 差均小于1.5%.结果表明:低温(1O.c左右)下保 存的祖师麻药材制备的样品稳定性较好,常温(2O ～