青岛农业大学-细胞工程.doc

绪论 细胞工程(cell engineering)是应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。又称细胞技术，是生物技术的主要内容之一。 生物技术是以生命科学为基础，利用生物体系和工程学原理生产生物制品和创造新物种的一门综合技术。 细胞工程的研究内容：细胞工程基本技术；细胞、组织、器官培养；原生质体培养；细胞融合及培养 生物技术主要包括：细胞工程、基因工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程和生物化工程。 细胞学说的提出：施旺，施莱登（1838年） 1902年，H aberlandt提出了细胞全能性学说 细胞工程分类（填空）:植物细胞工程和动物细胞工程 1.细胞工程的应用：（一）、脱毒和快速繁殖 许多植物，特别是无性繁殖植物，带有病毒，并直接传给子代，严重影响产量和质量。一般茎尖生长点不带病毒。所以，利用茎尖培养再生的植株，可能不带病毒，再进行大量繁殖生产脱毒苗。脱毒苗用于生产可明显提高产量、质量和商品价值。甘薯、马铃薯、草莓、果树、花卉等。（二）、细胞工程育种 1.?利用培养变异，筛选优良突变体 植物离体培养，能够明显提高突变率，并且会有各种各样的生理和形态突变，如株高、花色、植株形态、生育期、耐性等等。可以从中选择优良突变体，培育新品种。2、利用远缘杂交幼胚培养，获得杂种植株，克服其杂交不亲和性。有些植物远缘杂交，能正常受精，但受精胚往往败育。此种情况下，可以将幼胚在败育前进行离体培养，以获得缘远杂种植株。3.利用细胞融合技术，克服远缘杂交不亲和性。野生种往往有许多优良性状，但大部分野生种与栽培种杂交不亲和，严重影响了野生种优良遗传基因的应用。利用细胞融合，可以克服这种杂交不亲和性，获得体细胞杂种，使野生种的利用成为可能。（三）、离体种质保存随着地球不断开发、生态环境破坏，种质资源日趋枯竭，大量有用基因损失。利用组织培养法，超低温保存（-196℃ 2. 细胞工程主要研究内容（1）动植物细胞与组织培养 主要包括细胞培养、组织培养和器官培养。（2）细胞融合（3）染色体工程：按人们的需要来添加、削减或替换染色体的一种技术。主要用于新品种的培育。（4）胚胎工程：主要是对动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作获得人们所需要的成体动物，包括胚胎分割、胚胎融合、卵核称植、体外受精、胚胎培养、胚胎移植、性别鉴定、胚胎冷冻技术等。（5）细胞遗传工程：主要包括克隆和转基因技术。 第一章实验室的设备及其基本操作技术 第一节 实验室的设备 实验室设计最基本应该有三室：准备室、无菌操作室和培养室 第二节 培养基及其配制 培养基的成分及作用 2，一般培养基中的五类物质各有什么作用？1）无机营养成分，包括大量元素N，P，K，Ga，Mg，S和微量元素Fe, B, Mn, Cu, Co, Zn, Mo等; 2）有机营养成分，常用有机成分：糖类（蔗糖），维生素，肌醇，腺嘌呤，氨基酸。主要采用的是蔗糖，提供处于异养状态的植物组织所需要的碳元素；3）维生素，主要使用的有B1, B6和B5,补充离体状态下细胞内生维生素的不足，提高细胞的活力；4）激素，包括生长素、分裂素、脱落酸、赤霉素和乙烯。激素：生长素（根），细胞分裂素（芽），赤霉素（细胞伸长）；5）其他添加物质，例如琼脂作为培养基固化剂、山梨醇作为渗透压调节剂、活性炭作为吸附剂等。 4、蔗糖在培养基中有何作用？作为碳源为植物提供能源，为有机化合物的合成提供碳架，细胞内调节渗透压，对形态的发生的特殊作用等。 11、培养基内加入活性炭的目的是什么？应注意什么问题？ 活性碳可以吸附非极性物质和色素等大分子物质，包括琼脂中所含的杂质、培养物分泌的酚和醌类物质、蔗糖在高在压消毒时产生的5-羟甲糖醛、激素等。 2.植物激素 5、生长素类物质大致可分为哪几类，目前植物组织培养中主要使用了哪些生长素，生长素在离体培养中有何作用？1.吲哚类，2.奈酸类，3.苯氧羧酸类。植物组织培养中生长素一方面用于诱导愈伤组织的形成和生根，另一方面是与一定量的细胞分裂素配合共同诱导不定芽的分化、侧芽的萌发与生长以及某些植物胚状体的诱导。 6、在植物组织培养中，细胞分裂素有何作用？ 在植物组织培养中细胞分裂素的主要功能是促进细胞的分裂和分化，打破顶端优势，诱导芽分化与增殖，促进组织和器官的不定芽发育。 3.几种常用培养基 基本培养基种类：MS,B5,N6,White(P26) （1）高盐平衡培养基：MS培养基、LS培养基、BL培养基、BM培养基和ER培养基。特点：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性；营养丰富；微量元素种类全，浓度高。 （2）高硝态氮培养基：B5培养基，N6培养