头孢唑啉毒负作用探析.docVIP

头孢唑啉毒负作用探析 　　【摘 要】大剂量头孢唑啉在铁缺乏条件下可造成新西兰大白兔耳蜗内、外毛细胞静纤毛不同程度损伤。 　　【关键词】头孢唑啉；耳毒性 　　头孢唑啉是临床最常用的抗生素之一，广泛应用于婴幼儿、儿童及成人患者，它的毒性主要是过敏反应，对耳蜗的毒性作用鲜有报道。笔者在临床工作中注意到一些患铁缺乏症的婴幼儿或儿童在大剂量应用头孢唑啉后出现感音神经性聋。由此推测大剂量头孢唑啉在铁缺乏等特定条件下可能存在耳毒性。本实验通过对大剂量头孢唑啉在铁缺乏条件下对新西兰大白兔耳蜗毛细胞影响的研究，探讨大剂量头孢唑啉的耳毒性。 　　1.材料与方法 　　1.1材料 　　体重1.25～1.5kg的健康、ABR阈值正常的新西兰大白兔60只，耳廓检查外耳道皮肤无红肿、鼓膜完整、无中耳炎表现，耳廓preyer反射敏感。随机分为4组，每组15只。A组：正常对照组；B组：正常头孢唑啉组；C组：缺铁对照组；D组：缺铁头孢唑啉组。A、B组喂普通饲料，C、D组喂缺铁饲料，喂养至实验结束为止。饲养4周后开始用药，B、D组经耳缘静脉注射头孢唑啉0.5g/kg，每日2次，A、C组经耳缘静脉注射等体积生理盐水，连续用药2 周。停药后第15天处死作耳蜗电镜扫描及激光共聚焦显微镜观察。 　　1.2药物 　　同一批号的头孢唑啉钠盐粉针剂，由哈尔滨医药股份有限公司生产，国际GMP达标药品，均在有效期内，使用前新鲜配制。 　　1.3观察指标及方法 　　实验前及处死前断尾采血，应用HICN法和原子吸收光谱法分别测定血红蛋白（Hb）及血清铁（SI）含量；动物处死后沿正中矢状面剖开，分离颞骨，迅速打开听泡，在蜗顶外侧钻孔，用2.5%戊二醛和5%多聚甲醛耳蜗灌流1min，固定4～6h后在解剖显微镜下运用硬剥离法去除骨性蜗壳和螺旋韧带，分离椭圆囊、血管纹、暴露Corti氏器，将基底膜保留在蜗轴上，切好底座。将椭圆囊、血管纹、耳蜗在上述固定液中继续固定8h，再经1%锇酸固定2h，0.1MPBS充分洗净，乙醇逐级脱水，LG-1型临界点干燥仪干燥，解剖显微镜下定位，ID-5型离子镀膜机喷金镀膜， S-50型飞利浦扫描电子显微镜下观察基底膜、椭圆囊斑、血管纹的变化。经Phaalloidin染色后显微镜下进行组织铺片，注意组织摆放，纤毛面朝上，基底膜朝下，甘油封片，Leica激光共聚焦显微镜用激发光波长为488nm氖激光进行基底膜、椭圆囊连续扫描观察比较损伤的程度。 　　1.4统计学方法 　　采用SPSS11.5版统计软件进行统计分析。实验数据以均数±标准差（±s）表示，采用方差分析。 　　2.结果 　　2.1 Hb及SI含量 　　A组Hb含量为（117.5±7.2）g/L，SI含量为（13.8±1.1）μmol/L； B组Hb含量为（112.4±6.8）μg/L，SI含量为（13.5±1.2）μmol/L；C组Hb含量为（67.2±7.6）g/L，SI含量为（7.5±1.5）μmol/L； D组Hb含量为（63.2±6.5）g/L，SI含量为（7.2±1.0）μmol/L；C、D组较A、B组Hb及SI明显降低（P0.05），低于正常范围。 　　2.2 扫描电镜观察 　　A组各耳蜗内、外毛细胞纤毛完整，结构清晰，形态正常支持细胞表面结构完整，椭圆囊斑毛细胞纤毛完整，血管纹暗细胞完整；B组有2个耳蜗（13.3%）中区、顶区部分区域内、外毛细胞静纤毛轻度紊乱，纤毛缺失，内毛细胞纤毛倒伏、融合，支持细胞可见破坏，椭圆囊斑毛细胞纤毛倒伏、融合，血管纹暗细胞破坏，该组其余各期各耳蜗内、外毛细胞静纤毛结构清晰，形态大致正常；C组有3个耳蜗（20%）中区、顶区部分区域内、外毛细胞静纤毛散乱、扭曲、残缺不全或缺失。各耳蜗未发现明显内毛细胞改变，椭圆囊斑毛细胞纤毛倒伏、融合，血管纹暗细胞破坏，该组其余各期各耳蜗内、外毛细胞静纤毛结构清晰，形态大致正常；D组有9个耳蜗（60%）存在不同程度内、外毛细胞静纤毛散乱、扭曲、倒伏、残缺不全或缺失，以中区、顶区损害较重，其中有2个耳蜗中顶区部分区域表皮板变形、塌陷，部分毛细胞缺失。 　　2.3激光共聚焦显微镜观察耳蜗基底膜变化 　　A组耳蜗100μm基底膜62（58～64）个外毛细胞，B组耳蜗100μm基底膜60（54～64）个外毛细胞，C组耳蜗100μm基底膜60（56～64）个外毛细胞，D组耳蜗100μm基底膜46（40～52）个外毛细胞，D组外毛细胞明显减少，与A、B、C组比较差异有显着性（P0.05）；A组耳蜗底圈100μm基底膜有14（12～16）个内毛细胞，B组有12（10～16）个内毛细胞，C组有14（10～16）个内毛细胞，D组有6（4～10）个内毛细胞，D组内毛细胞明显减少，与A、B、C组比较差异有显着性（P0