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- 2018-09-03 发布于湖北
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实验目的学习从动物组织中提取DNA及其含量、纯度测定的原...新版14.ppt
bhj oo bhj oo * 實驗 P1 bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo bhj oo 实验目的 学习从动物组织中提取DNA及其含量、纯度测定的原理和方法 掌握离心机的使用方法 兔肝脱氧核糖核酸(DNA)的提取和测定 * jgyj 在0.15M的氯化钠溶液中脱氧核糖核蛋白的溶解度最低。用0.15M氯化钠溶液洗涤可洗去其它物质。 沉淀用SDS处理,SDS使蛋白质与DNA解离,再用氯仿-异丙醇抽提,将蛋白质沉淀除去,而DNA则溶解。 DNA溶液用乙醇沉淀析出。 实验原理 * jgyj 实验操作 1. 弃上清留沉淀 兔肝 称取4 g 加 8ml 1X SSC 1X SSC洗 两次 取8ml匀浆液 离 心 匀浆、过滤 2.弃上清留沉淀 加至8ml 1X SSC 离 心 加至 8ml 0.15M NaCl-0.1M Na2EDTA 离 心 3.弃上清留沉淀 (脱氧核糖核蛋白) * jgyj 加约2倍 体积 95% 乙醇 沉淀 加 0.15M NaCl-0.1M Na2EDTA至4ml 搅拌10min 逐滴加入0.5ml 15% SDS 加1ml 5M NaCl 去塞!离心 加塞反复 倒置抽提 10min 吸取上清液 勿吸到中间层! 等体积氯仿-异丙醇混合液 DNA析出 用玻棒挑出 挑取DNA至一离
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