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-高液相色谱法
HPLC的仪器配置 §11-9 高效液相色谱法 反相高效液相色谱法： 流动相的极性大于固定相的极性 正相高效液相色谱法： 流动相的极性小于固定相的极性 反相高效液相色谱法 一、流动相： 参与组分的分配，流动相直接影响组分的分离。 （1）具有合适的极性和良好的选择性； （2）溶剂与检测器匹配； （3）高纯度; （4）化学稳定性好; （5）低粘度（粘度适中） 最常用的流动相：水、甲醇、乙腈 水-甲醇（V/V） 水-乙腈（V/V） 二、化学键合固定相 固定相通过化学反应把各种不同的有机基团键合到硅胶（载体）表面的游离羟基上，代替机械涂渍的液体固定相。 反相化学键合固定相：十八烷基键合相 C18（ODS），C8，C1 三、检测器 （1）紫外检测器 （2）荧光检测器 （3）示差折光检测器 （4）电化学检测器 （5）化学发光 紫外检测器 2．流动相差别的区别 GC：流动相为惰性气体，组分与流动相无亲合作用力， 只与固定相有相互作用。 HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用 力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起 正向作用。且流动相种类较多，选择余地广。 第11章 高效液相液相色谱 HPLC 液相色谱的基本流程图 流动相 泵 色谱柱 检测器 泵输系统 分离系统 检测系统 记录系统 A E G B C D F 进样阀 进样系统 输液泵 自动进样器 色谱柱及柱温箱 检测器 数据处理系统 溶剂 固定相：极性小的烷基键合相 流动相：极性大的甲醇-水或乙腈-水 A =εb c HPLC与GC差别 1．分析对象的区别 GC：适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品； 占有机物的20%，应用于石油、环境等领域。 HPLC：适于溶解后能制成溶液的样品。 用途广泛，占有机物的80%，用于医药、化工、 食品、生物等众多领域
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