动物细胞工程----细胞融合单克隆抗体.pptVIP

动物细胞融合 二、单克隆抗体 B淋巴细胞与抗体 如何大量生产单克隆抗体？ 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 单克隆抗体 世界上第一只克隆羊“多莉”的培育过程如图所示，请据图回答： * 授课教师：杨丽娜 一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 动物细胞融合（也称细胞杂交） 是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 杂交细胞 融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 细胞A 细胞B 杂交细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 电激 聚乙二醇（PEG） 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞模上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活病毒诱导细胞融 合的原理 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。 细胞融合的应用 已成为研究细胞遗传，细胞免疫，肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 什么是抗体？ 　 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 B淋巴细胞产生抗体。 长期以来，人们为了获得抗体，采用的方法是向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后，从动物的血清中分离所需抗体。 缺点：产量低，纯度低，而且制备的抗体特异性差。 １．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 ２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万 种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　　 ３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 1 仅用细胞培养技术可行吗？ 我们所学的哪种细胞是可以无 限增殖的？ 有什么方法能使B细胞产生抗体 的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 两次筛选的目的 第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞，骨髓瘤细胞以及同类型融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞。 第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞很多种，所以需筛选出特定抗体的杂交瘤细胞。 　　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 　　特点： 　　　特异性强、灵敏度高 动物的胚胎移植 解决某些妊娠时间长、每胎产子数量少的优良种畜的繁殖速度问题。 胚胎移植技术 试管动物（婴儿）培养过程 卵细胞 精子 体外受精 受精卵 胚胎 新个体 母体子宫内 孕育、产出 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 5、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 乙 甲 a b c d e f (1)图中的甲为苏格兰绵羊，乙为多莉羊。那么，a和b是通过_______分裂形成的，其DNA含量是体细胞的 _______ ；c肯定是__ 细胞，乙的遗传性状与提供 ___________的绵羊 一致. 减数 一半 体 细胞核 *