单克隆抗技术简介.pptVIP

单克隆抗体技术简介 河南科技大学医学院 段冷昕 单克隆抗体技术的研究背景 杂交瘤技术原理简述 单克隆抗体技术的研究进展与意义 单克隆抗体技术的研究方向和存在的问题 单克隆抗体技术的研究背景 Georges J.F. Kohler 1975年将产生抗体的淋巴细胞同肿瘤细胞融合, 成功建立了单克隆抗体技术。 1984年获得诺贝尔医学和生理学奖。 Cesar Milstein Niels K. Jerne 理论依据 抗原分子上可以诱导出抗体的部位或片段，特称之为 抗原决定基 (antigenic determinant)；一个抗原分子上通常都有许多处抗原决定基，而每个决定基至少都可诱生出一种抗体；因此在传统抗血清中，都含有许多种不同的抗体，分别对抗这些不同的决定基。 对于分子构造相似的抗原，由于它们含有共同或相似的抗原决定基，所产生的抗血清对这两种相似的抗原都会产生反应；因此在检定此类抗原时，其 专一性 不很理想，常常会出现假阳性，也称为 交叉反应性。 同时又由于免疫动物的个别体质不同，对抗原的反应也有相当的差异，以致无法准确控制所得到每批抗血清 效价 的高低。 血清中的每一种抗体是由单一种B细胞 所分泌产生，若能把此 B 细胞由脾脏中挑出来，单独培养成细胞株，则可得单一种类的抗体，只会对一种 抗原决定基 反应，其专一性极高。 大量培养此细胞株，即可有质量一定、纯度均一的抗体，此即为 单株抗体。 然而 B 细胞不易在培养基中生长，虽然有人一直努力，想找出在体外培养脾脏细胞的条件，但结果均不甚理想，因此上述想法不易达成。 癌细胞 的生长不受控制，很容易在培养基中生长，有很多已经建立好的癌细胞株，其生长特性均已了解； 若把癌细胞永续生长的特性，利用细胞融合法导入可生产有用抗体的 B 细胞中，则得到可在培养基中永久生长的 B 细胞株，此即融合瘤细胞株。 杂交瘤技术原理简述 动物免疫 细胞融合 杂交瘤细胞的筛选 动物免疫 动物体内的B 淋巴细胞在特定外来抗原的刺激下, 可以大量增殖变成浆细胞, 以分泌针对该抗原的抗体。 这种抗体具有特异性, 动物免疫作用就是用特定的外来抗原对动物进行一次或多次免疫,以刺激其能分泌对于该抗原的B 淋巴细胞大量增殖, 从而得到大量产生专一反应的B 淋巴细胞。 细胞融合 B 淋巴细胞受外来抗原刺激后可以分泌抗体, 但在体外存活时间很短（最多两周）后即死亡。 而骨髓瘤细胞不分泌任何免疫球蛋白, 却能在体外长期存活。 如果将这两种细胞的特性结合起来, 就能得到既能分泌抗体又能在体外长期存活的细胞。 然而在杂交过程中必然将产生混合物, 因此就需要进一步筛选出其中唯一有用的杂交瘤细胞。 杂交瘤细胞的筛选 杂交瘤细胞由于继承了B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的双重特性。 能够合成HGPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）和TK（胸腺嘧啶激酶）, 故在HAT (H-次黄嘌呤、A -氨基喋呤、T-胸腺嘧啶)培养基中可长期存活。 在历经2 周左右的时间后即可得到该杂交瘤细胞, 成为制造单克隆抗体的细胞源。 单克隆抗体技术的研究进展 单克隆抗体生殖健康诊断试纸 早早孕检测试纸条 女性在怀孕以后体内会分泌绒毛膜促性腺激素。早期检测该激素, 对女性具有非常重要的指导意义。 女性排卵检测试纸条 准确检测出尿液中促黄体生成激素的峰值水平, 使女性能预知最佳的受孕或避孕时间。 乙肝表面抗原检测试纸条 特异性地检测标本中的乙肝表面抗原, 重复性好, 质量稳定。 吗啡类毒品检测试纸条 样品中的吗啡含量大于300ng／mg，即可被检出。 癌症及其它病症的研究和治疗 全球治疗性单克隆抗体上市情况列表 全球治疗性单克隆抗体上市情况列表.doc 全球在研治疗性单克隆抗体临床III期以上的品种列表 全球在研治疗性单克隆抗体临床III期以上的品种列表.doc 单克隆抗体技术的研究意义 如果将单克隆抗体作为一些肿瘤药物的包裹物, 那么药物将精确地到达肿瘤所在的部位。 单克隆抗体可以提高杀伤肿瘤的效果及减少副作用, 把一些抗癌药物或放射性同位素附在单克隆抗体上, 便能命中肿瘤细胞, 并且不损伤自身细胞,有的医学家称这种治疗为“导弹”疗法或“靶性药物”疗法。 在人类肺癌、肝癌、胃癌的治疗中也取得一定效果, 对于手术后或化疗后残存癌细胞, 单克隆抗体可以说是所向无敌。 单克隆抗体技术的研究方向 新一代单克隆抗体、疫苗类药物最新进展与前景与展望 新一代单克隆抗体、疫苗类药物的国际市场研究状况 新一代单克隆抗体、疫苗类药物生产的新工艺和新技术: 包括上游表达技术、细胞培养技术、抗体嵌合技术、抗体人源化技术、下游纯化技术、单抗及疫苗类药物新的制剂方法等 新一代单克隆抗体、疫苗类药物的产业化配套技术, 检测手段