化学性方法肝硬化物模型建立读书报告.pptVIP

化学性肝硬化动物模型造模方法 主要内容 肝硬化造模方法种类简介 机理分析、给药途径、剂量、优缺点 展望与思考 肝硬化造模的主要方法 化学性肝硬化模型 结扎胆总管肝硬化模型 实验性免疫肝硬化模型 血吸虫虫卵所致肝硬化模型 转基因肝硬化模型 复合法 化学性肝硬化模型 四氯化碳法 二甲基亚硝胺 二乙基亚硝胺 硫代乙酰胺 化学性单纯CCL4法机理分析 化学性单纯CCL4法给药途径 给药剂量 吴孟超经典模式 40%~60% CCl4橄榄油溶液皮下注射,0.3 mL/100 g体重,首剂加倍,每周2次,共8~12周 模型特点： 简便,费用低，易操作 动物个体差异较大,CCl4剂量不易掌握 停药后易逆转 化学性CCL4复合法 CCL4苯巴比妥联合诱导 机制 四氯化碳诱导慢性肝损伤的机理是直接损害肝细胞,破坏细胞的各种成分,造成肝细胞的脂肪变性与坏死 苯巴比妥钠通过提高细胞色素P450活性,从而增加肝细胞对四氯化碳的敏感性 CCL4苯巴比妥联合诱导给药途径 苯巴比妥：饮水中给药 四氯化碳：背部皮下注射 CCL4苯巴比妥联合诱导给药剂量 第一周每升蒸馏水中含0.35g苯巴比妥钠的溶液作为大鼠的惟一饮用水 第二周起按0.4mL/100g体重注射，每周2次，共10周 CCL4食用乙醇联合诱导-----机制 CCL4食用乙醇联合诱导给药途径 CCL4食用乙醇联合诱导给药剂量 CCL4复合法模型特点 动物模型周期缩短 形成率低 拒饮苯巴比妥或乙醇导致脱水、死亡 胃大出血而死亡 二甲基亚硝胺(DMN)给药途径 腹腔注射 二甲基亚硝胺(DMN)给药剂量 王献波等人,以DMN10 μg/kg剂量做腹腔内注射,每天1次,每周连续3天、共4周，成功形成肝硬化模型 1 %DMN 按 1m l/kg 腹腔注射，每周前 3 天给药，每天 1 次，持续 3 周，第 4 周仅在周一给药 1 次，成功形成肝硬化模型 二乙基亚硝胺(DEN)机理 DEN DNA双链 DNA编码错译 肝脏损伤 二乙基亚硝胺(DEN) 给药途径： 饮水中给药 二乙基亚硝胺(DEN)给药剂量 给药剂量： ★ 0.1g/L ★ 0.05g/L、2周后为0.1 g/L TA A（硫代乙酰胺）机制 TA A（硫代乙酰胺）给药途径剂量 给药途径：饮水中给药 给药剂量： 生理盐水配制成 30％溶液，作为实验动物的饮用水，8 周形成肝硬化 致癌药物造模（除CCL4）模型特点 共性： 周期短，死亡率相对较低 毒性大，易挥发，排泄物在 24 小时内含有毒性，易污染环境 需做好隔离，造模过程不方便 感悟与思考 因素探讨：多因素诱导法是否优于单因素诱导法？ 鼠较成熟，但是在兔、狗等中型动物身上是否相同？ 药物的剂量：文献中发现无论是鼠还是兔，都存在四氯化碳给药剂量相差10倍的问题，是小剂量还是大剂量应该在造模过程中采用？ 前期预实验 动 物：新西兰兔 造模药物：四氯化碳、乙醇 造模方法：四氯化碳复合法（四氯化碳2.5ml/kg 乙醇5ml） 单纯四氯化碳法(0.3ml/kg) 给药途径：四氯化碳皮下注射、乙醇灌胃 造模结果：1、单纯法四氯化碳造模成功率100% ，有一 例伴有腹水形成,无死亡 2、四氯化碳复合法死亡率75% CCl4通过肝微粒体细胞色素P450氧化酶激活后, 产生自由基CCl3-及Cl CCl3-与肝细胞内大分子发生共价结合,破坏肝细胞功能 肝纤维化、肝硬化 腹腔注射法 高死亡率 皮下注射法 灌胃 四氯化碳致肝纤维化动物模型实验条件的优化 国外 腹膜炎 不同剂量四氯化碳实验中， 0.1mL/100 g剂量最佳 CCL4苯巴比妥联合诱导