第三章2转录的延伸、终止及RNA的加工.pptVIP

一、转录的延伸 RNA链延伸的基本过程 RNA链延伸的暂停 RNA链延伸的再次启动 RNA链延伸的基本过程 核苷酸加到RNA链的3′-OH上，RNA链延长。 RNA链延伸的暂停 链延伸的速度不是恒定的，在DNA的某些区域，转录速度减慢或停止，常发生在富含GC区。 1、转录终止概述 终止时,核苷酸不再添加到延伸的RNA链上，开放三元复合物解体。 终止可能既需识别终止序列，也需RNA产物的发夹结构。 2、大肠杆菌的两类终止子 终止子（terminator） 不依赖ρ因子的终止（Rho-independent） 无其他因子参与，核心酶能在某些位点终止转录。 依赖ρ因子的终止 （Rho-dependent） 终止子结构 1) 二级结构中的发夹(长度7-20 bp) 靠近基部通常有一个G-C富集区。 2) 转录单位最末端对应的DNA有连续4-8个A组成的片段。 在大肠杆菌基因组中，符合这些标准的序列约有1100个，这暗示了约一半基因拥有不依赖ρ因子的终止子。 ② ρ因子的作用机理 三、真核生物RNA转录的终止 (1) RNA聚合酶Ⅰ在18个碱基形成的终止子序列处终止转录； 五、原核生物与真核生物mRNA的特征比较 1、转录发生的部位 细菌mRNA的转录和翻译发生在同一细胞空间；转录、翻译、降解间隔时间很短，或者几乎同步进行。 真核生物mRNA合成与成熟完全在细胞核内发生，而翻译在细胞质中完成；其转录、翻译、降解三者间间隔时间较长。 原核生物mRNA (1) 许多是以多顺反子形式存在； (2) 5′端无帽子结构； (3) 3′端没有或只有较短的poly(A)。起始密码AUG上游7-12个核苷酸处有一被称为SD (Shine-Dalgarno sequence)的保守区，与16S rRNA 3′端保守核苷酸反向互补。 rRNA保守区：3′-UCCUCC-5′ 真核生物mRNA结构特征 5′ Gppp+pppApNpNp … 5′GpppApNpNp…+PP+P mRNA 5′末端帽子特征的生物学功能： I: 使mRNA免遭核酸酶的破坏，保持其结构的稳定性； II: 有利于蛋白质合成起始因子的识别，从而促进翻译的起始。 高等真核生物（除组蛋白基因）的mRNA， 3′端具有poly(A)尾巴，长度40－200 bp。 应用二： 可设计寡聚Oligo (dT)片段合成cDNA (4) 真核生物mRNA中常含有内含子 3. 生命周期 原核生物mRNA寿命较短，通常只能翻译几分钟； 真核生物mRNA寿命较长，可持续翻译几小时。 （一）tRNA的加工 （二）rRNA的加工 （三）mRNA的加工 （一）tRNA的加工 1. 原核生物tRNA的加工 参与蛋白质合成的tRNA不是最初的转录产物 (1) 它们的5′端都是单磷酸，而原始的转 录产物5′应是三磷酸； (2) 最终的tRNA分子比初始转录物小； (3) tRNA含有特殊的碱基，这些碱基是通过一些化学修饰产生的。 tRNA加工时需要多种核酸酶参与： 如：RNase D、E、F和P等，RNaseP主要在tRNA的5′起作用。它由蛋白质和RNA组成，它不识别特殊序列，只识别二级结构。 RNaseD主要负责切除3′序列。 tRNA核苷酸转移酶，催化3′末端的CCA的生成。 缺-CCA的tRNA要用tRNA核酸转移酶加-CCA。 (5) 修饰：通过甲基化酶，硫醇酶，假 尿嘧啶核苷化酶等进行修饰，如氨 基酸臂的4-硫尿苷，D臂的2甲基鸟苷，TψC臂的假尿 苷（ψ）和反密码子环上的2异戊 腺苷。 2. 真核的tRNA的加工 真核tRNA的基因和原核生物的异同： (1)真核的前体分子tRNA是单顺反子，但成 簇排列，基因间有间隔区； (2)真核tRNA基因一般都比原核tRNA基因多 得多，如酵母约有400个tRNA基因； (3)增加了剪接内含子的过程。 (4)都要加CCA。 （二）rRNA的加工 1. 原核rRNA的加工 大肠杆菌中具有7个编码rRNA的操纵子； 原初转录物30S，由5S、16S、23S rRNA和一些 tRNA构成； Rnase III 参与rRNA加工。 2.真核生物rRNA的加工 45S 前体rRNA形成后立刻与蛋白质结合，加工发生在核糖体上，而不是游离的rRNA上。 (1) 切除5′端的前导序列； (2) 从45S的中间产物中先切下18S的片段。 mRNA前体分子的加工主要是真核mRNA，原核的mRNA