实验四细菌质的接合转移.pptVIP

实验四 细菌质粒的接合转移 李晓华 程国军 一：目的要求 了解在自然条件下微生物遗传信息传递的方式； 掌握细菌质粒转移的原理和流程。 二：基本原理 在质粒转移过程中，供体菌与受体菌细胞通过结合作用紧密接触，质粒从供体细胞向受体转移，同时进行质粒复制，这就是结合转移的过程。按能否自主转移，将天然存在的质粒分为两大类。 1．转移型质粒：多为低拷贝的大质粒，含有完整的转移操纵子基因（tra）和转移起始位点。能在同种或亲缘关系近的菌体细胞间进行转移。例如： 大肠杆菌：F因子、R1、R100、R6K、RP4…… 天蓝色链霉菌：致育性因子pSCP1、pSCP2…… 2．非转移型质粒：多为高拷贝的小质粒，如大肠杆菌的ColE1、RSF1010等。由于缺少转移基因（tra），不能自主转移，但由于含有与F质粒类似的bom（或nic）位点或诱动基因mob（mobilization），因而能被带有tra基因的转移性质粒诱动而发生转移。 转移子的筛选 筛选培养基为：基本培养基+抗生素； 供体和辅助大肠杆菌均营养缺陷型，不能在基本培养基上生长； 未转化成功的受体菌不能在有抗生素的平板上生长。 三：实验菌株 供体菌：E.coli DH5α(pTR102) (TcR)，含有 mob基因 ； 受体菌: 紫云英根瘤菌 ( TcS) ；