肠道致病菌检验简述.ppt

第七章 肠道致病菌的检验与鉴定 ;第一节 概述;二、生物学特性; 三、抗原类型 ;四、 致病性; 五、微生物检验的基本程序;思考题;第二节、沙门氏菌检验; （四）沙门氏菌的分类地位及定义;二、生物学特性 ;(沙门氏菌（红色）侵入人体细胞 ;2、对营养要求不高，在普通培养基生长良好，37 ℃，24h，能形成菌落中等大小，直径2～3mm，圆形或卵形，表面光滑湿润，无色半透明，边缘整齐的菌落 3、在液体培养基中，呈均匀混浊性生长，无菌膜。 ;（三）、生化特性 1、发酵GLU，甘露醇，山梨醇产酸产气（伤寒鸡伤寒沙门氏菌少数不产气） 2、不发酵乳糖，蔗糖，侧金黄花醇 3、多数产生H2S（+），不产靛基质（-），不分解尿素（-），不产生乙酰甲基甲醇（V—P）（-）， 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐（+） 5、在KCN培养基中生长（-），苯丙氨酸脱氨酸（-）;（四）、抗原结构 主要两种： 　　　　　A、O??原 　　　　　B、H抗原 　　　　　C、表面抗原（K抗原） 　　　D、菌毛抗原;2 、O抗原 （1） O抗原的表示方法 共有58种，用字母O和阿拉伯数字标记：O1 、O2 、O3、 O4 如： 伤寒杆菌： O9 、O12;（2）沙门氏菌的分群及表示方法 用大写字母及相关符号表示： A、B、C、D、E、F ……Z、 O51 ~O63、 O65~ O67 ;（3）沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原 A群----O2 B群----O4 C群----O6 C1群----O7、 C2群---- O6 O8 、 C3群----O8 、 C4群----O6 O7 O14 D群----O9 F群----O11 E群----O3 E2群----O3、 O10族 E3群----O3、 O15 E4群----O1 、O3 、O19;3、H抗原（鞭毛抗原） ;4、表面抗原： ;三、沙门氏菌食物中毒 ;(三)、中毒原因 ;（四）、临床病状（所致病菌） ;四、微生物检验 ;1、前增菌：用无选择性的培养基使处于濒死状态的M恢复活力; 2、选择性增菌：使沙门氏菌优势繁殖，基它细菌变到抑制; 3、选择性平板分离培养：分离出所需的细菌; 4、生化试验：鉴定分离出来的细菌是否符合所检项目的细菌; 5、血清学鉴定：进一步鉴定。;（二）、检验操作关键点 ;2、平板分离 ;BS上的菌落;3、五项生化试验 ;（1）三糖铁培养的培养; （2）其余四项生化实验;（3）、典型沙门氏菌的五项生化反应及其检验的利用;B、利用五项生化反应鉴定沙门氏菌的最简单方案 ;5、血清学试验（最后鉴定） ;（2）、血清学检验步骤 ;五、检验结果的报告;思考题：;5、沙门氏菌哪几个菌型具有Vi抗原，Vi抗原对O抗原血清涟试验有何影响，对含Vi抗原菌，如何做O抗原血清学试验。 6、沙门氏菌在SS平板，TSI培养基上生长的现象如何，说明其原理。 7、分离纯化后怎样选用最少的生化试验方法初步鉴定检验菌是否是沙门氏菌属的细菌。 8、如何进行沙门氏菌的血清学试验。;第三节、志贺氏菌的检验 ;（二）、培养特性;（三）、生化反应;（四）、抗原结构;2、志贺氏菌的分群与血清型;志贺氏菌属抗原的分类;葡萄糖+;3、属内外抗原关系;（3）属外抗原关系： 志贺氏菌与艾希氏菌属的O抗原关系非常密切，除A群9型和D群宋氏菌与埃氏希菌的O抗原关系未见报道外，每一个型都与一定的艾希氏菌的O抗原有关。 ;4、K抗原对O抗原血清学试验的影响 可阻碍O抗原的血清学凝集试验，煮沸处理即可。 ;（五）志贺氏菌的抵抗力;二、志贺氏菌的致病性与食物中毒;传染源;（二）志贺氏菌的致病性;（二）临床症状;三、微生物检验 ;（二）检验操作要点;1、增菌培养;2、分离培养 ;HE平板原理及反应 ;SS平板原理及反应 SS Agar (Salmonella Shigella Agar);麦康凯琼脂平板 ;EMB平板照片及原理 ;3、初步生化鉴定 ;三糖铁（TSI）琼脂试验的原理;志贺氏菌在TSI生长的结果（现象）： （1）斜面产碱仍为红色或粉红色； （2）底层产酸不产气，变黄色； （3）不产H2S，不出现黑色。 志贺氏菌在半固体培养基生长：沿线生长，无动力。 ;在志贺氏菌检验中可弃去的培养物：; 4、血清学试验和生化鉴定试验 ;（2）进一步的生化试验;（3）生化分群; 5、结果报告： ;