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- 2018-09-14 发布于湖北
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完成实验 提出问题 作出假设 设计实验 分析结果,得出结论 该探究活动中涉及4个科学方法: (1)数学模型法; (2)抽样检测法; (3)显微观察法; (4)微生物培养法。 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 关注本实验中的几个关键点: 酵母菌的计数 利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数法,也叫做显微镜直接计数法。 优点:直观、快速。 适用于稀释的菌悬液(或孢子悬液),即液体培养基中菌体的计数。 此法计得的是活菌体和死菌体的总和,又称为总菌计数法。 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数 (1)计数工具——血球计数板 实物图 正面图 侧面图 计数室 滴液处 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。 计数时,常采用样方法。 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 酵母菌的计数 (1)计数工具——血球计数板 放大后的计数池 每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。 每个计数池分为9个大方格。 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 25个中格 16个小格 16个中格 25个小格 25X16 = 400小格 16X25 = 400小格 每个计数室(大方格)共有400小格,总容积为0.1mm3 * * * * * * * * * 抽样检测: 5×16=80个小格 抽样检测: 4×25=100个小格 酵母菌的计数 (2)计算: 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少? 酵母细胞个数/mL= 所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数 所数的小方格数 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行,血球计数板每个大方格容积为0.1mm3 ,由400个小方格组成。现对某一样液进行检测,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先??????? 后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有????????? 个。 例1 :在用血球计数板(2mm×2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵母菌 ?? ?? 个。 2x107 2×108 稀释 例3? 检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1 mm3。 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻?? 个/mL。 5n×105? 酵母菌的计数 (3)计数的操作 稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释;若菌液不浓, 可不必稀释。 镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检 。若有污物,则需清洗后才能进行计数。 加样品:在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无 菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴 入一小滴(将计数室充满即可),让菌液沿缝 隙自行渗入计数室。注意不可有气泡产生。 探究培养液中酵母菌种群数量 的动态变化 酵母菌的计数 (3)计数的操作 显微计数:静止5分钟后,先用低倍镜(16×10)找 到计数室所在的位置。然后根据血球计数 板规格,每个计数室选取5个(或4个)中 方格中的菌体进行计数。每个小方格内约 有5-10个菌体为宜。对于压在小方格界线 上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。如 遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半 时,即作为两个菌体计数。计数一个样品 要从两个计数室中计得的值来计算样品的 含菌量。 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
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