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学校代码：__11059__ 学 号：1002011044
Hefei University
本科毕业论文
BACHELOR DISSERTATION
论文题目：高产果胶酶海洋青霉的固态发酵条件研究
学位类别： 工科学位
学科专业：生物工程专业
作者姓名：鲁彬彬
导师姓名：吴茜茜
完成时间：2014.5.15
目录
摘要 Ⅰ
abstract Ⅱ
1 前言 1
1.1 果胶酶的发酵方法 1
1.1.1固态发酵 1
1.1.2 液态发酵 2
1.1.3 固液联合发酵 2
1.2 果汁澄清 2
2 材料与方法 3
2.1实验材料 3
2.1.1实验仪器 3
2.1.2试剂 3
2.1.3 实验菌株 4
2.1.4培养基及配方 5
2.1.4.1 细菌培养基 5
2.1.4.2 放线菌培养基 5
2.1.4.3 霉菌培养基 5
2.1.4.4 海洋菌培养基 6
2.2、实验方法 7
2.2.1产果胶酶菌株的筛选 7
2.2.2 产果胶酶菌株的扩大培养 7
2.2.3 果胶酶活的测定方法 7
2.2.3.5 标准曲线的绘制 8
2.2.5 酶活的计算 8
2.2.5.1 酶活计算公式 8
2.3 菌种X06-1固态发酵条件优化研究 9
2.3.1初始固态发酵培养基 9
2.3.2 X06-1菌株的发酵优化 10
2.3.2.1 不同碳源对X06-1菌株产果胶酶的影响 10
2.3.2.2 不同氮源对X06-1菌株产果胶酶的影响 10
2.3.2.3不同pH对X06-1菌株产果胶酶的影响 10
2.3.2.4不同接种量对X06-1菌株产果胶酶的影响 10
2.3.2.5不同温度对X06-1菌株产果胶酶的影响 11
2.3.2.6不同料水比对X06-1菌株产果胶酶的影响 11
2.3.3 正交试验 11
2.4果汁澄清 12
3 结果与分析 13
3.1 透明圈实验 13
3.2 X06-1菌株固态发酵条件的优化 14
3.2.1 碳源的优化 14
3.2.2 氮源的优化 15
3.2.3 pH的优化 15
3.2.4 接种量的优化 16
3.2.5 温度的优化 16
3.2.6 料水比的优化 17
3.3 正交试验 17
3.4 澄清实验 18
4 结论 20
5 参考文献 21
6 致谢 22
摘要
本实验主要是采用刚果红染色法，从实验室提供的二十一株菌株中筛选出8株产果胶酶的菌株，对其中高产果胶酶的菌株——扩展青霉X06-1进行了固态生长条件优化，分别对扩展青霉X06-1的最佳碳源、氮源、最适接种量和料水比，以及最适pH和温度进行了优化，研究表明最佳碳源为果胶，氮源为硫酸铵，温度为28℃，接种量为1 m，料水比为1:1。通过正交试验得到最优发酵条件：果胶粉，硫酸铵，培养温度为30℃，接种量为2×107的孢子液 1 m，最佳料水比为1:1，最佳pH 6。将获得的果胶酶用于苹果汁的澄清，并获得很明显的效果。
Abstract
Eight strain of pectinase-producing microbes were selected from 21 strains by using Congo red staining, The optimization of solid growth conditions on which high pectinase strain --Penicillium expansum X06-1,Penicillium expansum X06-1 the optimal inoculation quantity and ratio of material to water,It optimized the pH and temperature, It is show that the best carbon and the nitrogen source were pectin, ammonium sulfate, the optimum temperature is 28 ℃, the optimum inoculation was 1 mL, the best ratio of material to water is 1:1. Th
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