【毕业论文】Sinofiler_试剂盒在广东汉族人群的法医学应用研究.docVIP

南方医科大学生物医学工程系 毕业论文 - PAGE ５ - Sinofiler_试剂盒在广东汉族人群的法医学应用研究 目前，短串联重复序列（short tandem repeat，STR）是法医DNA分析中最常用的一类遗传标记。STR广泛分布于人类基因组中，重复单位长度为2-6bp，属微卫星序列，平均每6Kb～10Kb就有一个STR基因座，总数估计有20到40万个【1，2,3】。STR基因座绝大多数位于非编码区，极少数出现在编码区【4,5】，其中约有一半以上具有遗传多态性【6】。因为STR基因座多态性片段一般在400bp以下，故PCR扩增成功率高，检测灵敏度高，重复性好，适用于微量、陈旧、腐败检材以及接触DNA即脱落细胞的DNA分型鉴定。自1985年英国遗传学家Jeffreys在法庭上首次应用DNA指纹技术鉴定一宗移民纠纷案，同年Cetus公司Mullis等人发明聚合酶链式反应技术（PCR）以来【7】，经过二十多年的发展，各种新技术、新仪器不断出现，检验的遗传标记不断地增加，提供的信息不断地增多，涉及的理论不断地深入完善，各种研究数据不断地丰富，我国各省地市的院校、公安司法部门的刑事科学技术研究所的DNA实验室如雨后春笋般大量地建立，使法医DNA应用得到了广泛地飞速地发展，DNA检验技术也得到了很大的提高，我国的刑事科学技术研究所应用该技术成功地鉴定了大量疑难案件的生物物证，在刑事案件的侦破、一些重大事故的尸源认定、民事案件的解决上发挥了重要作用。从1986年我国开始用银染法鉴定3个等位基因座（有代表性的是美国Promega公司研发的三套系统：CTT: CSFIPO 、 TPOX、TH01；FFv：F13A01、FESFPS、vWA；Silver Ⅲ:D16S539、D7S820、D13S317。），到用荧光复合扩增、毛细管电泳检测的Profiler Plus 试剂盒9个等位基因座到Identifiler试剂盒、Power Plus试剂盒的16个等位基因座；其累积匹配概率从10-9到Profiler Plus的10-10到Identifiler、Power Plus的10-18【7】；从个案的鉴定到法庭科学DNA数据库的全国联网，在个体认定、亲缘鉴定方面逐步过渡到科学、高效、高度公信力的状况。 众所皆知的2009年7月5日发生在新疆乌鲁木齐市的7.5打砸抢烧严重暴力犯罪事件，导致197人死亡，1600多人受伤（官方报道），公安部物证鉴定中心对此特大事件的大量生物物证：死者、伤者、嫌疑人血样，血衣等的两千余份检材进行了检验。截止我写稿日期，2009年3月8日，最高人民法院审理97案判处了198人，此间DNA在罪犯和犯罪的认定方面发挥了重要的作用。 值得一提的是，2004年10月20日郑州煤业集团公司大平煤矿发生一起煤与瓦斯突出而引发的特别重大瓦斯爆炸事故。造成148名矿工遇难，32人受伤。当时我们用Identifiler试剂盒检验了腐败、不腐败的遇难人员血样、肌肉等114份，在尸源认定方面做了大量的工作，那时的数据库数据量还不是很大，我们获得了较为满意的结果。 随着人类基因组计划的完成，更多的STR基因座被发现，其中一些基因座能力更强，更适合法医学应用，发展新一代的试剂盒成为可能，也很有必要。为了适应中国国情，提供针对中国人群的较大识别力试剂，美国应用生物系统公司开发研制了AmpF.STR? Sinofiler. PCR试剂盒，除了含有Identifiler试剂盒D8S1179, D21S11,D7S820,CSF1PO, D3S1358, D13S317, D16S539, D2S1338, D19S433, vWA, D18S51, D5S818 和 FGA. 13个基因座外，特别将识别力低的TH01、TPOX基因座 替换成了D6S1043和D12S391。这两个基因座多态性更高(特别在中国汉族人群体)[8]。为了使Sinofiler.试剂盒得到更好的应用，一些问题还需要进一步调查和研究。主要有以下几个方面: 1.群体多态性:多态性频率资料是准确计算个体识别力、非父排除率、多态信息含量等重要的法医学参数,是评估法医学应用效力的基础数据。任何遗传标记在应用于刑事鉴定或民事鉴定之前都必须对其进行准确的群体多态性调查研究。但我国有关不同人群STR基因座多态性频率资料样本量普遍较少，难以保证观察样本能够代表该群体的基因频率分布资料，人群之间的差异性比较也不多。本研究从分析了郑州市公安局收集的无关人血样，代表了广东广大居住地的随机人群。将检测分析结果作统计学分析，了解STR基因座的等位基因数、基因分布频率。证实调查结果是否符合遗传平衡定律(Hardy一We