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PAGE \* MERGEFORMAT 23 1微生物学绪论（Introduction to Microbiology） 微生物（microorganism）的概念 是存在于自然界中的一群形体微小，结构简单，肉眼看不见，必须借助显微镜才能观察到的微小生物。 真核细胞（eukaryotic cell）型微生物、原核细胞（prokaryotic cell）型微生物和非细胞（acellular cell）型微生物的特点及其种类，主要区别 郭霍三原则Kochs postulates 为研究微生物致病性奠定了基础： 1）必须有规律地能在可疑病例中发现并分离出同一种微生物。 2）微生物必须能在体外获得纯培养，并能传代。 3）这种培养物接种于易感动物，应能引起典型疾病，并从这种实验感染动物中能分离出同种微生物。 医学微生物学的发展简史A Brief History of Microbiology （一）传染病病因认识时期 （二）微生物形态学时期 （三）微生物生理学时期 （四）免疫学兴起时期 （五）发现病毒时期 （六）化学和抗菌素疗法研究的发展时期 （七）现代微生物学时期 Antony Van Leeuwenhoek 自制显微镜，能放大约300倍，观察井水、牙垢、积水及动物粪便等，发现许多微小生物，称为“活的野兽”，并首次描述了细菌的形态有球形、杆状和螺旋样等。 Louis Pasteur 微生物学开始成为一门独立的学科。 ①有机物的发酵和腐败均由不同微生物引起；用S形曲颈瓶实验证明，微生物不是 “自然生成”(spontaneous generation)； ②用加热61.2 °C 30分钟可防止酒和牛奶变质，创立了Pasturazation。 ③对蚕病、鸡霍乱、炭疽病和狂犬病等的病原进行了研究。 Robert Koch 创立了细菌染色法、固体培养基及实验动物感染等实验方法。“郭霍三原则”（Kochs postulates），为研究微生物致病性奠定了基础： 2 细菌的形态与结构（Morphology and Structure of Bacteria） 革兰氏染色法（Gram stain）的原理、材料、步骤、结果判断及意义 原理：细菌涂片依次经结晶紫初染、碘液媒染、酒精脱色及复红复染，结果凡不被酒精脱色而保留结晶紫染色的称为革兰氏阳性菌，能被酒精脱色而被复红染成红色的称为革兰氏阴性菌。 （G+细胞壁脂质少、肽聚糖层厚切交联度大，不易被酒精脱色，G-脂质多、肽聚糖薄且交联度小，脱色时脂质溶解，细胞壁通透性增加，结晶紫-碘复合物易脱去。） 抗酸染色法（acid-fast stain）的原理、材料、步骤、结果判断及意义。 意义：（分枝杆菌属细菌，细胞壁中含有大量类脂，使菌体不易着色。）特异性地针对分枝杆菌属细菌的鉴别染色发。抗酸染色阳性的称为抗酸杆菌（acid-fast bacilli）。 步骤：石碳酸复红初染、盐酸乙醇脱色和美蓝复染。 原理：初染在加热和石碳酸存在的强烈条件下，有助于复红染料进入菌体；盐酸乙醇可脱去样品中杂菌或组织细胞的颜色，但分枝杆菌所含分枝菌酸能抵抗其脱色作用，是菌体保持红色，复染时杂菌或组织细胞被染为蓝色作为背景，衬托出红色的分支杆菌。 细菌基本形态、大小的测量单位 球菌coccus（双球菌，链球菌，葡萄球菌），杆菌bacillus（单杆菌，双杆菌，链杆菌），螺形菌spiral-shaped bacterium（弧菌，螺菌，螺旋体）。um 细菌的结构 基本结构：拟核，细胞质，细胞膜，细胞壁 特殊结构：菌毛，荚膜，芽孢，鞭毛 细菌细胞壁（cell wall）的化学组成及功能 肽聚糖。维持形态，抵抗低渗，物质交换，具抗原性和染色性。 肽聚糖结构 聚糖骨架(peptidoglycanbackbone)： N-乙酰胞壁酸β-1,4 糖苷键N-乙酰葡萄糖胺 四肽侧链(peptide side chain) ：与聚糖骨架上N-乙酰胞壁酸相连 五肽交联桥(peptideinterbridge)：在G+菌中连接相邻四肽侧链 革兰阳性细菌与革兰阴性细菌细胞壁的主要区别 革兰氏阳性菌细胞壁 革兰氏阴性菌细胞壁 肽聚糖含量丰富，20~50层 肽聚糖含量少，1~3层 三维立体结构= 聚糖骨架+ 四肽侧链+ 五肽交联桥 二维平面结构= 聚糖骨架+ 四肽侧链 含特有组分磷壁酸（维持胞壁结构、带负电、抗原性、粘附性），某些菌有表面蛋白 肽聚糖外有外膜(脂质双层+ 脂蛋白+ 脂多糖) 周浆间隙(periplasm) = 外膜与内膜之间的间隙 脂多糖LPS（内毒素）Lipopolysaccharide(LPS) = Endotoxin的化学组成和生物学作用 结构： O-特异性多糖 + 核心多糖 + 脂质A（连接外膜） 种特异性O抗原 属特