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植物细胞的脱分化脱分化
第11章 植物组织培养 提纲 植物组培的研究进展 1.植物组织培养的理论基础 1.1植物的无性繁殖 1.2植物细胞全能性理论 1.3植物细胞的脱分化与再分化 2.植物组织培养 2.1实验材料的清洗和消毒 2.2培养基 2.3接种 2.4种质保存 2.5植物细胞的大规模培养技术 思考题 组培问题 植物组织培养发展简史 1、萌芽阶段:(从20世纪初到30年代中) 2、奠基阶段(从20世纪30年代末到50年代中) 3、快速发展和应用阶段(从20世纪50年代末至今) 单倍体育种 原生质体融合 第11章 植物组织培养 11.1 植物组织培养的理论基础 11.1.1 植物的无性繁殖 11.1.2 植物细胞全能性理论 11.1.3 植物细胞的脱分化与再分化 11.2 植物组织培养的过程 11.2.1 植物材料的清洗与消毒 11.2.2 培养基 11.2.3 接种 11.2.4 种质保存 11.2.5 植物组织和细胞的大规模培养 11.1植物组织培养的理论基础 植物组织培养(Tissue culture) 是指用无菌方法使植物体的离体(in vitro)器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称,也称之为离体培养(In vitro culture)或试管培养。 11.1.1植物的无性繁殖 一、有性生殖 1、有性生殖是生物界中最普遍的一种生殖方式。它是指两个性细胞两两结合形成合子,进而形成新的个体。性细胞是通过减数分裂产生的。 2、优点:其后代具有了两个亲本的遗传物质,具有更大的生活力和变异性。 二、无性生殖 无性生殖是不经生殖细胞的两两结合,由母体直接产生新个体的方式。从本质上讲,是由体细胞进行的繁殖就是无性生殖。 植物无性生殖的方式主要是营养生殖------ 由植物营养器官(根、茎、叶)的一部分,在与母体脱落后,发育成一个新的个体。 如马铃薯的块茎、蓟的根、秋海棠的叶 营养生殖 营养生殖 营养生殖 summary 植物中常常有性繁殖和无性繁殖共存,在有性繁殖受到破坏的时候(花被破坏)通常会选择无性繁殖. 有性繁殖使个体的基因发生变异,能更好的适应环境, 无性繁殖往往花费较少的能量,且成功机会高。 11.1.2 植物细胞全能性理论 定义:1902年由Haberlandt提出,即植物体细胞在适当的条件下,具有不断分裂和繁殖、发育成完整植株的能力。 20世纪80年代:每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息,在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整再生植株。 11.1.3 植物细胞的脱分化与再分化 1、细胞分化(cellular differentiation)。 含义:由一个或一种细胞增殖产生的后代,在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程。 随着分化发育的进程,细胞逐渐丧失其分化潜能。从全能性到多能性,再到单能性,最后失去分化潜能成为成熟定型的细胞。 植物细胞的分化 细胞分化是组织分化和器官分化的基础,是离体培养再分化和植株再生得以实现的基础。 2、植物细胞的脱分化 脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞在一定条件下,重新获得分裂能力,产生愈伤组织的过程,又称去分化。 或者说,离体培养条件下,一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生组织细胞状态或胚性细胞的状态的过程。 愈伤组织的诱导 愈伤组织:脱分化后的细胞,经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团。 愈伤组织的诱导是组培的第一步和关键步骤。 愈伤组织的种类: 分为:胚性愈伤组织 (Embryonenic callus)和非胚性愈伤组织。 胚性愈伤组织:能形成体细胞胚的愈伤组织 。 质地较坚实,颜色有乳白色或黄色,表面具球形颗粒,其生长缓慢;从细胞学来看,胚性愈伤组织由等直径细胞组成,细胞较小,原生质浓厚,无液泡,常富含淀粉粒,核大,分裂活性强。 非胚性愈伤组织:不能分化形成体细胞胚。 愈伤组织(callus)培养 (1)、愈伤组织的形成 在细胞脱分化过程中,大多数情况下形成愈伤组织。愈伤组织的细胞往往是异质性的,无明显极性,其形成过程可分为诱导期、分裂期和分化期。 形成过程(三个时期) 诱导期(起动期):是细胞准备分裂的时期。细胞大小几乎不变,内部发生生理生化变化,迅速合成蛋白质和核酸。 分裂期:外层细胞分裂,中间细胞常不分裂,形成小芯。细胞分裂快,结构疏松,缺少结构,浅而透明。在原培养基上,细胞必分化,及时转移,其可无限制地进行细胞分裂,维持不分化状态。 分化期:细胞在形态和生理功能上的分化,出现形态和功能各异的细胞。 愈
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