第十二一章核酸及蛋白质生物合成.pptVIP

第十一章 核酸及蛋白质的生物合成 中心法则的建立和发展 核酸的生物合成 蛋白质的生物合成 第一节 中心法则的建立和发展 中心法则的建立 中心法则的发展 一、中心法则的建立 DNA是生物遗传的主要物质基础。DNA分子上含有生物体生长发育所需要的全部遗传信息，在细胞分裂前通过DNA的复制，将其由亲代传递给子代，在后代的个体发育过程中，遗传信息自DNA转录给RNA，并指导蛋白质合成。 1958年，Crick将其概括为遗传信息传递的中心法则。 二、中心法则的发展 80年代以后在某些致癌RNA病毒中发现遗传信息也可存在于RNA分子中，由RNA通过逆转录的方式将遗传信息传递给DNA。这为中心法则加入了新的内容。因此，1971年，Crick对中心法则作了进一步补正与完善。 第二节 核酸的生物合成 DNA的复制 反转录 RNA的转录 RNA的复制 一、DNA的半保留复制 1953年Watson和crick提出DNA双螺旋结构模型时推测，在DNA复制时，亲代DNA的双螺旋先行解旋和分开，然后以每条链为模板，按照碱基配对原则，在这两条链上各形成一条互补链。这样，从亲代DNA的分子可以精确地复制成2个子代DNA分子。每个子代DNA分子中，有一条链是从亲代DNA来的，另一条则是新形成的，这叫做半保留复制。 证实DNA半保留复制机制的著名实验  1958年Meselson和Stahl利用氮标记技术在大肠杆菌中首次证实了DNA的半保留复制。 他们将大肠杆菌放在含有15N标记的NH4Cl培养基中繁殖了15代，使所有的大肠杆菌DNA被15N所标记，可以得到15N-DNA。然后将细菌转移到含有14N标记的NH4Cl培养基中进行培养，在培养不同代数时，收集细菌，裂介细胞，用氯化铯(CsCl)密度梯度离心法观察DNA所处的位置。由于15NDNA的密度比普通DNA(14N-DNA)的密度大，在氯化铯密度梯度离心时，两种密度不同的DNA分布在不同的区带。 Meselson和Stahl密度梯度离心试验 半保留复制的概念 在DNA复制时，亲代DNA的双螺旋先行解旋和分开，然后以每条链为模板，按照碱基配对原则，在这两条链上各形成一条互补链。这样，从亲代DNA的分子可以精确地复制成2个子代DNA分子。 每个子代DNA分子中，有一条链是从亲代DNA来的，另一条则是新形成的，这种复制方式叫做半保留复制。 DNA聚合酶 DNA聚合酶是复制中最主要的酶之一，它可以在模板上催化四种5-三磷酸脱氧核糖核苷(5-dNTP)在模板上聚合，形成新的DNA多核苷酸链。 大肠杆菌DNA聚合酶 1957年，美国 斯丹福大学医学中心kornberg报道在大肠杆菌的培养液中发现了能催化DNA合成的酶，根据发现者的名字被称为kornberg酶。此酶发现后，人们曾一度认为它就是我们要找的复制酶。但,后来科学家们又在E.coli中相继发现了另外两种DNA聚合酶，kornberg就把kornberg酶称为DNA聚合酶I。 三种DNA聚合酶的共同性质 1957年，Arthur kornberg首次在大肠杆菌中发现DNA聚合酶Ⅰ(简写DNA polⅠ)后来又相继发现了DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶Ⅲ(简写DNA polⅡ,DNA polⅢ)。三种酶的共同性质是： ①需要DNA模板，因此这类酶又称为依赖DNA的DNA聚合酶。 ②需要RNA或DNA做为引物，即DNA聚合酶不能从头催化DNA的起始。 ③催化dNTP加到引物的3-OH末端，因而DNA合成的方向是5′→3′。 ④三种DNA聚合酶都属于多功能酶，它们在DNA复制和修复过程的不同阶段发挥作用。 真核细胞内有五种DNA聚合酶 二、反转录(RNA指导下的DNA合成) 以RNA为模板，按照RNA中的核苷酸顺序合成DNA，这与通常转录过程中遗传信息流从DNA到RNA的方向相反，故称为反转录或逆转录。 逆转录酶需要模板，以四种dNTP为原料，要求短链RNA或DNA）作为引物，沿5’→3’方向合成DNA 。 三、转录(DNA指导下的RNA合成) DNA是遗传信息的载体，遗传信息的作用通常是由蛋白质的功能来实现。然而，分子遗传学的研究表明，DNA作为蛋白质的合成的模板并不是直接参与蛋白质的合成，而是通过一个中介物——RNA来起作用的。 转录是指以DNA的一条链为模板在RNA聚合酶催化下，以四种核糖核苷磷酸为底物按照碱基配对原则，合成一条与DNA链的一定区段互补的RNA链的过程。