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南瓜多糖提取分离纯化及其抗氧化活性的研究展
摘要: 南瓜多糖是一类具有重要生物活性的功能性成分,其具有广泛的开发前景。对南瓜多糖的提取、分离纯化及抗氧化活性的研究现状进行综述,并展望了其今后研究方向及开发应用前景。
关键词: 南瓜多糖;提取;分离纯化;抗氧化活性
南瓜为葫芦科南瓜属一年生蔓性草本植物,其营养成分丰富,具有很高的食疗保健作用[1-2]。而南瓜中的多糖具有降血脂、降血糖、防癌等多种功能[3]。对南瓜多糖的研究及相应功能食品的开发逐渐受到重视,其中南瓜多糖抗氧化活性的研究是人们普遍关注的问题之一。文章对南瓜多糖的提取、分离纯化方法及对其抗氧化活性的研究做一综述。
1 南瓜多糖的提取方法
1.1 热水浸提法
由于多数多糖在热水中的溶解度较大且性质稳定,热水浸提法是提取多糖最常用的方法。李俊丽[4]等采取热水浸提法对南瓜多糖的提取进行了研究,提取工艺的最佳条件为:1:40的料液比,在70℃水浴条件下提取3次,每次提取4 h。向东[5]等在用热水提取南瓜多糖的研究中发现,热处理对致密的南瓜组织有疏松作用,从而使细胞内的多糖更容易浸提出来。热水浸提法是一种常用的提取植物多糖的传统方法,操作简便,所得多糖生物活性好,但多糖得率低,费时费工。
1.2 碱法提取法
由于碱液能减弱植物细胞壁分子间的作用以增加多糖的提取率,所以碱法也常用于提取多糖。向东[6]等采取碱法提取法提取南瓜多糖,得出最佳的提取工艺条件为:提取温度80℃ ,提取时间2 h,液固比5:1,NaOH浓度0.4 mol/L。碱处理对致密的南瓜组织有疏松作用,能提高多糖的提取率,但由于在碱液的作用下还原糖会因发生反应使获得的南瓜提取液色泽较深,呈棕色,很难除去。
1.3 超声提取法
超声提取法是利用超声波的热效应、机械效应和空化作用破坏细胞,使水溶性多糖更易提取。赵二劳[7]等采用超声提取法对南瓜多糖的提取进行了研究,得出最佳的提取工艺条件为:以水为提取剂,预浸时间10 min,超声作用时间20 min,提取温度60℃,超声波功率80 w,占空比1,此时多糖的提取量最大可达42.6 mg/g。孙俊[8]等通过试验确定了超声提取的最佳工艺条件,并通过DPS分析软件建立了数学模型。超声提取能缩短提取时间,提高提取率,且得到的多糖生物活性性质也不会改变,但此方法难以扩大规模。
1.4 复合酶提取法
选择合适的酶,可温和地将植物组织细胞壁分解,以有利于多糖的释放,提高提取率。常用的酶类有纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶等。王洪伟[9]等采取复合酶法对南瓜多糖的提取进行了研究,结果表明,复合酶法提取南瓜多糖的提取率得到很大提高达28.8%。徐雅琴[10]等将热水浸提法、超声波法和复合酶法进行了比较,得出复合酶法多糖提取率最高,得到的粗多糖色泽好,蛋白质含量低。复合酶提取法是一种较为有效的提取方法,分解了细胞壁使多糖更易提取,且可以降解蛋白质,具有条件温和、杂质易除和得率高等优点。
1.5 其他方法
赵二劳[11]等研究了南瓜多糖的微波提取,确定了优化条件,此方法具有快速、节能、操作简便、提取率高且对生物活性无影响等优点。向东[12]等通过对超声波提取和缓冻法提取的比较,发现缓冻的效果优于超声波。缓冻可以使植物细胞内产生冰晶,使细胞组织易受伤破碎,能强化多糖的提取。此外,还有有机溶剂沉淀法等。
2 南瓜多糖的分离纯化方法
提取得到的南瓜多糖液一般先需要经过醇沉,醇沉时要考虑乙醇的用量。张涛[13]等对不同乙醇用量对南瓜多糖沉淀量的影响进行了研究,得出样液与乙醇溶液的体积比1:5为沉淀南瓜多糖的乙醇用量。熊冰[14]等也做了同样的研究得出相同的结论。杨宁[15]等在野仙人掌多糖抗氧化性的研究中发现,使用不同浓度的乙醇得到的多糖对其抗氧化性也会产生一定的影响。醇沉得到的多糖要经过脱蛋白、脱色、透析等操作。南瓜多糖脱蛋白的常用方法有:Sevag法[16]、三氯醋酸(TGA )法[17]等。向东 等在用活性炭对南瓜粗多糖液脱色试验中确定了活性炭脱色的最佳工艺条件。而吴国欣[19]等则采用H202法对提取的南瓜多糖液进行脱色。方积年[20]等认为,活性炭脱色时,由于活性炭对多糖也有较强的吸附作用,会使多糖损失很大,推荐使用双氧水法脱色,但必须严格控制脱色条件,如多糖溶液的浓缩、温度、时问、pH等。透析是用于除去粗多糖中的小分子杂质,提取南瓜多糖时用于调节pH的缓冲试剂也会在醇沉时沉淀下来,必须通过透析等操作除去。
由于传统的水提醇沉等连续操作只是局限于实验室阶段,可实现工业化生产的不多。随着科学技术的发展,一些新的提取纯化方法得以应用。吴建中[21]等研究了超滤技术在南瓜多糖浓缩纯化过程中的应用
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