梅毒螺旋体抗体在诊断新生儿梅毒中应用和讨论.docVIP

梅毒螺旋体抗体在诊断新生儿梅毒中应用和讨论 　　[摘要]目的：探讨梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP）抗体在诊断新生儿梅毒中的应用。方法：分别用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、TP-ELISA和密螺旋体颗粒凝集实验（TPPA）法对84例确诊新生儿梅毒患者与100例健康新生儿血清进行检测。结果：三种检测梅毒螺旋体抗体方法的灵敏度分别为51.2%、98.8%和100%，相对而言，TRUST法不适合作为诊断新生儿梅毒的初筛试验。结论：TP-ELISA法灵敏度与特异性相对较高，操作简便易行，建议作为诊断新生儿梅毒的初筛试验；TPPA法由于操作繁琐复杂，可结合临床作为新生儿梅毒的确诊试验。 　　[关键词]梅毒螺旋体抗体；新生儿梅毒；甲苯胺红不加热血清试验；双抗原夹心酶联免疫吸附试验；密螺旋体颗粒凝集实验 　　[中图分类号]R759.1 [文献标志码]A 　　苍白密螺旋体（treponema pallidum，TP）苍白亚种，又称梅毒螺旋体，是性传播疾病梅毒的病原体。人类是梅毒螺旋体的唯一传染源，性接触直接传染是最主要的传播途径，但患梅毒的孕妇可经胎盘感染胎儿，多发生于妊娠4个月之后。通过胎盘梅毒螺旋体进入胎儿血流，经血流扩散至全身，发生全身性感染，并在肝、脾、肾上腺等处大量生长繁殖，致流产、早产或死胎的发生。而晚期感染成活的胎儿患有先天性梅毒（congenitalsyphilis，CS），常出现特殊体征如马鞍鼻、间质性角膜炎、先天性耳聋、锯齿形牙等。妊娠期梅毒常无明显症状，为潜伏梅毒，而新生儿先天性梅毒易误诊漏诊，使新生儿身体造成不可逆转的伤害。为了控制与避免梅毒螺旋体感染对新生儿造成巨大危害，控制先天性梅毒的发病率，规范、严格的产前梅毒筛查和先天性梅毒的早期诊断则显得尤为重要。临床症状和梅毒血清学检测是目前临床上对新生儿梅毒进行诊断的主要标准。新生儿先天梅毒有多种临床表现，症状体征缺乏特异性，并可造成多脏器累及。另外，发生漏诊或者误诊，往往是由于父母不知情，或者故意隐瞒梅毒病史。梅毒螺旋体侵入人体后刺激人体产生两类抗体，分别为宿主对螺旋体表面的脂质做出应答产生的非特异性抗类脂抗原抗体，与B细胞产生的IgM、IgG两种特异性梅毒螺旋体抗体。梅毒血清学检测根据使用抗原不同，分非特异性类脂质抗原检测与特异性密螺旋体抗原检测两大类，非特异性脂质抗原检测主要用于对梅毒的初步筛查，包括不加热血清反应素（USR）、快速血浆反应素（RPR）及甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等；特异性密螺旋体抗原检测使用的抗原是梅毒螺旋体的特异成分，主要包括荧光密螺旋体抗体吸收（FTA-ABS）、密螺旋体颗粒凝集实验（TPPA）和胶体金法，这些方法常用于确诊梅毒感染。由于母体IgM抗体不能通过胎盘，而胎儿B细胞只能产生IgM，出生3个月后才能合成IgG，故TP-IgM抗体检测是新生儿先天性梅毒早期诊断最理想的方法。本研究对比讨论了不同梅毒螺旋体抗体检测方法在诊断新生儿梅毒中的特点与临床应用。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择本院新生儿科2006年4月至2014年5月确诊梅毒的新生儿84例及新生儿母亲84例作为研究对象。病例纳入标准：（1）经实验室、病理学检查确诊为梅毒患者，符合《2015美国疾病控制中心性传播疾病（梅毒）治疗指南》；（2）患者可出现硬下疳、多形性皮损等临床表现：（3）患者签署知情同意书，自愿参与研究。排除标准：（1）合并心、肝、肾等其他器官严重器质性病变患者：（2）意识不清及精神疾病患者。其中确诊为梅毒新生儿年龄1h～14d；男44例，女40例。同时选择我院健康新生儿100例作为对照。患儿年龄为1h～6d。均采集空腹静脉血（无溶血、脂血）2 3mL，离心分离血清-20℃保存待检。 　　1.2 方法 　　1.2.1 仪器与试剂 TRUST试剂盒（上海荣盛生物科技有限公司，生产批号：140123），TP-ELISA试剂盒（厦门英科新创科技有限公司，生产批号：140319），TPPA试剂（日本富士瑞必欧株式会社珠海丽珠有限公司，生产批号：VN40628）。 　　1.2.2 TRUST试验 该试验以包被有心磷脂的胆固醇做为载体，与血清中的非特异性抗体发生抗原抗体反应，形成胶体微粒。血清中的抗体，与混悬于甲苯胶红溶液中的抗原微粒反映出现肉眼可见的粉红凝集块即判断为阳性。按试剂盒说明书要求，按1：2、1：4、1：8、1：16、1：32对待测血清进行倍比稀释，观察呈现阳性反应的最高稀释度报告梅毒血清TRUST滴度。 　　1.2.3 TP-ELISA法检测 该检测方法使用超声波击碎的Nichol株为抗原，用双抗原夹心ELISA法，来检测TP抗体是否存在于待测血清中。将高纯度TP特异抗原包被于微孔反