SARS的分子生物学.PPTVIP

SARS 的 基 本 概念 Severe Acute Respiratory Syndrome SARS 的 基 本 概念 传染性非典型肺炎（SARS）是由 SARS 冠状病毒（SARS-CoV）引起的一种急性传染性肺炎，以发热、肺部进行性炎症和呼吸困难为主要临床表现，呈家庭和医院聚集性感染，主要通过与病人密切接触时经飞沫传播，传染性强，病死率较高，人群普遍易感。 二、SARS-CoV的生物学 冠状病毒是成人普通感冒的主要病毒之一，可引起上呼吸道感染，一般很少波及下呼吸道； 潜伏期一般为2-5天，平均为3天； 典型的冠状病毒感染呈现流涕、不适等感冒症状，病程一般在一周左右，临床过程轻微，没有后遗症；也可引起儿童的急性胃肠炎，严重者可出现血水样便； 呼吸道冠状病毒感染通过空气飞沫传播，感染高峰在秋冬或早春； 冠状病毒（coronavirus） RNA病毒中最大的基因组，长度约27～32kb 具有5’端帽状结构和3’端poly A尾 直接以病毒基因组RNA为模板翻译出病毒RNA聚合酶 利用该酶完成负链亚基因组RNA(submRNA)的转录合成、各结构蛋白mRNA的合成，以及病毒基因组RNA的复制 不产生cDNA 在宿主细胞内质网处装配生成新的冠状病毒颗粒，并通过高尔基体分泌到细胞外 2. SARS冠状病毒（SARS-CoV） 室温下在大小便里至少能存活1-2天 在腹泻病人的大便里（更高的pH值）能存活到4天以上 室温下在塑料的表面可以存活24小时 置于4℃和-80℃ 21天后，病毒滴度只有轻微下降 细胞培养上清中的病毒在室温放置两天后滴度只下降了一个数量级 温度 56℃ 90 min 75℃ 30 min 100℃ 10 min 紫外线 30 min 消毒剂 过氧乙酸（0.5%） 几分钟 二氧化氯 （1000mg/L） 几分钟 目前还未阐明 可能经过三个阶段 病毒侵入和复制 过度免疫应答 急性肺损伤 三、SARS-CoV的基因组 全长29k左右，具有5’端帽状结构和3’端poly A尾 结构和功能上和已知的冠状病毒相似 和所有已知的冠状病毒都有明显的不同 现 有 SARS 病 人 诊 断 标 准 1、流 行 病 学史：接触史（1.1)或疫区史（1.2) 2、主要临床表现：发热、咳嗽、呼吸困难 3、实 验 室 检测：白细胞不高或降低 4、胸部X 线检查：片状侵浸性阴影 5、抗 菌 素 治疗：无明显效果 疑 似 诊 断 标 准：﹡ 1.1+2+3 ﹡ 1.2+2+4 ﹡ 2+3+4 临 床 诊 断 标 准：﹡ 1.1+2+4及以上 ﹡ 1.2+2+4+5 ﹡ 1.2+2+3+4 医学观察诊断标准：﹡ 1.2+2+3 实验室诊断在SARS诊断中的作用 可进行早期诊断和确诊性诊断 病原学和血清学检测可为临床提供早期或确诊依据 相关疾病的排除性检测可为临床诊断提供重要依据 主要方法 1、细胞培养 2、分子生物学检测 RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR 基因芯片 3、血清学检测 检测对象：抗体、抗原 检测方法：ELISA、免疫荧光检测法 五、SARS疫苗 被动疫苗 马抗SARS-CoV血清 减毒活疫苗和灭活疫苗 滴鼻液 基因工程亚单位疫苗和合成寡肽疫苗 S蛋白、N蛋白 重组病毒载体疫苗和病毒样颗粒疫苗 腺病毒 DNA疫苗 S蛋白 病毒的物理结构 病毒的基因组结构 S蛋白和N蛋白的功能 * * SARS的分子生物学 Smile And Remain Smile Coronavirus，CoV 1. 冠状病毒（coronavirus） 六角型结构 平均直径为100nm 包膜 棘突 皇冠 核壳体呈疏松状态 冠状病毒基因组特点 各个结构蛋白成熟的mRNA的合成没有转录后的修饰剪切过程 通过识别特定的转录调控序列（ transcription regulatory sequences，TRS），有选择性地从负义链RNA转录 病毒的生命周期 球型 直径约100nm 包膜 棘突 核壳体 病毒的生物特性 杀灭病毒 发病机理 1. S protein - 1255aa 178 205 374 390 RNA 结合区 核转移 信号 N C 2. N Protein－422 aa 病毒包装进病毒衣壳中 与mRNA相互作用，影响病毒RNA的转录和复制 34 12 在病毒体组装时起到关键性作用，E和M蛋白很可能形成病毒最小的组装机制 3. E Pro