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细胞生物学研究技术 福建农林大学生命科学学院 张 健 一 细胞形态结构的观察方法 （一）、光镜技术 1、几种常见光学显微镜 A 普通光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体；③机械装置，用于固定材料和观察方便。 ※分辨率与放大倍数 分辨率：指显微镜能分辨物体最小间隔的能力，分辨力的大小决定于光的波长和镜口率以及介质的折射率，用公式表示为： R=0.61λ /N．A． 其中 N．A．＝ｎsinα/2 （n=介质折射率；α=镜口角；N.A.=镜口率； λ＝入射光波长） 放大倍数＝物镜倍数 目镜倍数＝N.A（500－1000） 部分介质的折射率 介质 空气 水 香柏油 α溴萘 折射率 1 1.33 1.515 1.66 普通光线的波长为400~700nm，因此显微镜分辨力数值不会小于0.2μm。 B 暗视野显微镜 使用特殊的照明方法，使照明光线不直接进入物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至 4~200nm的微粒子，分辨率可比普通显微镜高50倍。 应用：观察未经染色的活体或胶体粒子。 C 相差显微镜（PCM） 1953年获得诺贝