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- 2018-09-14 发布于湖北
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细胞生物学实验课
细胞工程实验 课程组成员:杨慈清 、李虎、王红霞、许重洁 实验一 动物细胞的培养 一、实验目的 掌握干热灭菌法、湿热灭菌法和滤过除菌法的操作。 了解化学消毒法的使用方法。 了解传代细胞的传代方法及操作过程,学习观察体外培养细胞的形态及生长状况及细胞增殖动力学测定的方法。 二、实验原理 细胞培养是一种操作繁琐而又要求十分严谨的实验技术。要使细胞能在体外长期生长,必须满足两个基本要求:一是供给细胞存活所必需的条件,如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖及其有关的生长因子、氧气、适宜的温度,注意外环境酸碱度和渗透压的调节。二是严格控制无菌条件。 三、实验方法 四、作业与思考 1.简述细胞传代培养的操作程序及注意事项。 2.细胞培养获得成功的关键要素是什么? 3.简述体外培养细胞的形态特征及其生长阶段。 4.绘制细胞生长曲线图。 5.绘制细胞分裂指数图。 实验二 细胞融合技术与染色体提前凝集标本制备 一、实验目的 通过细胞融合技术,初步了解染色体提前凝集标本制备原理、方法及间期细胞三种时相的提前凝集染色体特点。 二、实验原理 M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染
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