油菜籽中转基因成份定性PCR检测方法（编制说明）.doc

油菜中转基因成分检测 普通PCR和实时荧光PCR方法 编制说明 1 基本信息 1.1 标准草案名称 中文 油菜中转基因成分检测 普通PCR和实时荧光PCR方法 英文 Detection of Genetically Modified Ingredients in Rapeseeds Conventional and Real-time PCR Methods 1.2 与国际标准和国外先进标准一致程度情况 等同 修改 非等效 标准号 / 英文名称 / 中文名称 / 1.3 任务来源 批准立项的文件名称和文件号 关于下达2011年出入境检验检疫行业标准复审修订计划项目的通知 计划编号 2011B474r 1.4 制（修）订情况 制订 修订 替代的标准编号 SN/T 1197-2003 1.5 起止时间 2012.1-2013.9 1.6 起草单位 中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院 1.7 起草人 潘良文、李 想、黄 新、吕 蓉、杨捷琳、刘月明、高 琴。 1.8 专业类别 1、食品（化妆品）检验；2、卫生检疫；3、动物检疫；4、植物检疫； 5、纺织产品检验；6、轻工产品检验；7、机电产品检验；8、化工、矿产品和金属材料检验；9、管理；10、鉴定；11包装及危险化学品 1.9 标准体系表代码 1.10 调整情况 本标准与SN/T 1197-2003相比，主要修改如下： ——修改了标准的中文名称和英文名称； ——增加了实时荧光PCR检测方法； ——增加了品系特异性检测方法。 2 背景情况 2.1 目的、意义 油菜是一种重要的油料作物，每年我国要进口300-500万吨油菜籽和菜粕，主要来自加拿大、欧盟、澳大利亚、印度等国家。其中来自加拿大的油菜籽绝大多数为转基因油菜籽。自2002年起我国农业部相继对7种转基因油菜品系颁发了安全证书，包括MS1×RF1，MS8×RF3，MS1×RF2，Oxy235，RT73，T45和Topas19/2。这些转基因油菜品系转入的外源基因和调控元件多种多样，在口岸对转基因油菜籽和菜粕实施检测过程中，没有针对各转基因油菜品系的品系特异性检测方法，给检测工作带来极大不便。另外，在对进口的油菜籽和菜粕是否含有转基因成分的鉴定中，若初检发现外源基因的存在，则需进一步对具体的转基因油菜品系进行鉴定。 现有的检验检疫行业标准《油菜籽中转基因成分定性PCR检测方法》中只规定了筛选检测和基因特异性检测的方法，已不能满足口岸实际检测的需要。进口的转基因油菜籽多为多种转基因油菜品系的混合，因此我国的现有标准不能满足口岸油菜籽转基因成分检测的需要，急需对现有检验检疫行业标准 SN/T 1197- 2003 《油菜籽中转基因成分定性PCR检测方法》 进行修订和补充。 2.2 与国内外相关标准、文献的关系 本项目将对现有行业标准 SN/T 1197-2003 油菜籽中转基因成分定性PCR检测方法 进行修订，以补充基于7种转基因油菜 MS1RF1，MS8RF3，MS1RF2，Oxy235，RT73，T45和Topas19/2品系特异性序列的普通PCR和实时荧光PCR检测体系和方法。 国家标准 GB/T 19495.4-2004附录D和GB/T 19495.5-2004 附录G中对转基因油菜GT73结构特异性检测方法进行了简要描述。但两个国家标准中均仅涉及GT73品系，而且实时荧光检测体系不涉及品系特异性检测，而进口的转基因油菜籽多为多种转基因油菜品系的混合，且品系特异性检测方法特异性更强。因此我国的现有标准不能满足口岸油菜籽转基因成分检测的需要。 3 编制过程 3.1 准备阶段（可选项） 1 资料查阅 在课题开始立项前，上海出入境检验检疫局就查阅了大量的国外和国内资料数十篇，并对国外权威网站进行检索。我们对现有转基因油菜品系进行了汇总，并对其含有的外源基因等情况进行总结和分析，同时也对现有检测方法和体系进行汇总和分析。 2 样品收集 我们对国外目前已经批准商业化的转基因油菜品系样品进行了收集和购置。 3.2 分工情况 根据任务下达要求，上海出入境检验检疫局负责中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《油菜中转基因成分检测 普通PCR和实时荧光PCR方法》的修订工作。 3.3 标准草案编写情况 本标准草案是按照GB/T 1.1-2000《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》的要求进行编写的。在任务下达的期限内，上海出入境检验检疫局相关技术人员积极查阅资料、收集样品和方法验证，对转基因油菜筛选检测、基因特异性检测和品系特异性检测普通PCR和实时荧光PCR方法进行了优化、筛选和验证，同时邀请5家单位进行了鉴定。在以上研究、验证和鉴定的基础上，2013年9月完成了标准草案的修订编写工作。 3.4 征求意