实验 六凝 胶过滤层析-新版.pptVIP

kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk kjk nljk 实验 六 凝 胶 过 滤 层 析 * hkhuku 一 实验原理 凝胶层析是将样品混合物通过一定孔径的凝胶固定相，由于在层析过程中样品不同的蛋白质具有不同的洗脱，使不同的分子量的组分得以分离的层析方法。凝胶层析的分离过程是在装有多孔物质如交联聚苯乙烯、多孔玻璃、多孔硅胶、交联葡聚糖等填料的柱中进行的。 填料颗粒含有许多不同大小的孔隙。这些孔隙对于溶剂分子而言是很大的，他们可以自由扩散出入。对于溶质分子而言，如果分子大小合适时，则可以不同程度地往孔隙中扩散，大分子量的溶质分子只能占有较小的孔隙，而小分子量的溶质分子除能占住大孔隙外，还可以占有另外一些起更小的孔隙。 * hkhuku 一 实验原理 所以随着溶质分子尺寸的减小，其占有孔隙体积迅速增加。当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时，由于溶质分子在孔隙中溶剂与颗粒溶剂之间进行扩散分配的差异造成较小的分子在柱中停留的时间比大分子停留的时间要长，所以整个样品按分子大小顺序而分开，最先洗脱出来是最大的分子。 * hkhuku 一 实验原理 其定量关系符合以下公式： Ve=Vo+KV1