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硫磺菌固体和液体培养研究 　　摘要：从野外采集、分离纯化得到硫磺菌（Laetiporus sulphureus ）菌株，并进行硫磺菌的固体和液体培养试验。试验表明，硫磺菌在复合PDA培养基上生长良好，菌丝生长速度为3.2 mm/d；在代料栽培中以麦粒或栎木屑培养基培养硫磺菌菌种时菌丝生长速度快，菌丝浓密；从8种液体培养基配方中筛选出菌丝体产量较高的配方，配方为：葡萄糖30 g，豆粉20 g，玉米粉10 g，酵母提取物5 g，KH??2PO??4 1 g，CaCO??3 2 g，MgSO??4 0.5 g，水1000 mL，菌丝体产量为22 g/100 mL。?? 　　关键词：硫磺菌；?A固体培养；?A液体培养 　　中图分类号：S646.01;S567.301?ξ南妆晔堵耄?A 　　 　　硫磺菌［Laetiporus sulphureus (Fr.) Murrill］别名硫磺多孔菌、硫色多孔菌、黄芝，属非褶菌目（Aphyllophorales），多孔菌科（Polyporaceae），硫磺菌属（Laetiporus），是一种食药兼用大型真菌。硫磺菌多发生于夏季，生于栗、柳、云杉、栎、落叶松等活立木树干、树桩或枯立木上，生长部位可引起木材褐色块状腐朽；栽培香菇的段木上有时也有该菌生长，被视为“杂菌”。野生硫磺菌分布范围广，在全国大部分地区均有分布。卯晓岚（2000）在《中国大型真菌》中记载：“硫磺菌幼时可食用，味道好。药用，性温、味甘，能调节机体、增进健康、抵抗疾病，对人体可起重要调节作用。有抗癌作用，对小白鼠肉瘤180及艾氏癌抑制率分别为80％和90％”［1］。专利产品[专利号为CX]硫磺菌制剂[口服液、粉（散）、胶束、蜜丸剂型]，具有迅速缓解病情，可产生即时药效应；对“气胀”病、结肠炎等疾病治愈率可达90%以上。可见，硫磺菌食用、药用价值高，有一定开发前景。 ?? 　　硫磺菌目前主要靠野生采集得到，液体培养或固体培养的研究均少有报道。驯化培养研究方面，吴锡鹏（1993）报道以木屑作机质培养可以得到子实体［2］。王娟等（2006）报道硫磺菌发酵液中具有抗菌活性物质，对细菌、霉菌和植物病原菌均有较好的抗菌活性［3］。?? 　　食药用菌人工栽培受产地环境条件的影响，季节的限制，产量全年分布不均。而采用液体培养获得菌丝体的方式不受季节限制，生产周期短，易于人工控制，菌丝体产量稳定，近年来逐渐受到重视。本实验室就野生硫磺菌进行分离、纯化，通过多种培养基配方进行固体和液体培养方法的研究，为今后进一步开发利用硫磺菌提供依据。?? 　　1 材料与方法 　　 　　1.1?Σ牧? 　　1.1.1??供试菌株 　　硫磺菌菌株为本实验室自南京瓦屋山野外采集，分离、纯化而来。?? 　　1.1.2?Ω春?PDA培养基 　　马铃薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨2 g，MgSO??4 2 g，K??2HPO??41.5 g，KH??2PO??4 1.5 g，VB??1 10 mg，琼脂18 g，水1000 mL。用作母种分离及复壮培养基。?? 　　1.1.3?ζ桨迮嘌?基 　　 PDA培养基。?? 　　1.1.4?ε嘌?基质 　　麦粒培养基（A1）：麦粒1000 g，石膏12 g，碳酸钙3 g，水适量。?? 　　栎木屑培养料（A2）：栎木屑88%，麸皮10%，石膏1%，石灰1%，MgSO??40.05%，KH??2PO??40.1%,料水比(W/W)为1∶1.2。?? 　　杂木屑培养料（A3）：杂木屑88%，麸皮10%，石膏1%，石灰1%，MgSO??40.05%，KH??2PO??40.1%,料水比(W/W)为1∶1.2。?? 　　棉籽壳培养料（A4）：棉籽壳78%，麦麸20%，石膏2%,料水比(W/W)为1∶1.2。?? 　　1.1.5?σ禾迮嘌? 　　配制8种液体培养基进行液体培养实验，各培养基配方如下：?? 　　B1：苹果200 g，土豆200 g，蛋白胨2.0 g， K??2HPO??41.5 g，KH??2PO??41.5 g，MgSO??4 2.0 g，葡萄糖20 g，VB??110 mg，水 1000 mL。?? 　　B2：栎木屑200 g，土豆200 g，蛋白胨2.0 g， K??2HPO??42.0 g，KH??2PO??41.5 g，MgSO??42.0 g，葡萄糖20 g，VB??110 mg，水1000 mL。?? 　　B3：葡萄糖30 g，豆粉20 g,玉米粉10 g,酵母提取物5 g , KH??2PO??4 1.0 g, CaCO??32.0 g , MgSO??4 0.5 g,水1000 mL。?? 　　B4：淀粉浆40 g,蔗糖10 g,葡萄糖1