DNS法在普鲁兰多糖发酵液中糖测定的研究.docVIP

DNS法在普鲁兰多糖发酵液中糖测定的研究 分析检测Vo1.29,No.02,2008 DNS法在普鲁兰多糖 卷瓣是 韩德权,章佳佳 (黑龙江大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150080) 农品,II鲥妓 摘要:普鲁兰是由出芽短梗霉菌株(Aureobasidiumpullulans)发酵生产的胞外多糖,普鲁兰多糖含量多少是判断发酵 成功与否的标志,而多糖含量的准确测定对发酵的过程控制特别重要.本文研究了DNS法在普鲁兰多糖发酵液中糖 测定的应用,同时研究了色素和不同比例乙醇对DNS法测定出芽短梗霉发酵液中残糖和总糖的影响.结论为色素对 总糖的测定有干扰,对上清液中的残糖的测定没有影响;不同比例乙醇对DNS法测定糖含量没有影响. 关键词:出芽短梗霉,普鲁兰,DNS法 ApplicationofDNSmethodtothedetermination ofsaccharidecontentinPullulanfermentationbroth HANDe-quan,ZHANGJia-jia (CollegeofLifeSciences,HeilongjiangUniversity,Harbin150080,China) Abstract:ThePullulaniSex0poIysaccharides(EPS)producedbyfermentationofAureobasidiumpullulams.The contentofPullulansiSanindicationthatthefermentationiSsuccessfuIornot.Theaccuratedeterminationofthe POIvsaccharidecontentiSveryimportanttotheprocesscontroIoffermentation.Thispaperstudiestheapplication oftheDNSmethodindeterminingsaccharidecontentinPullulanfermentationbrothandtheeffectofpigmentand ethanoIindifferentratioondeterminingresiduaIsaccharideandtotaIsaccharideintheAureobasidiumpuIlulans fermentationbrothwithDNSmethod.TheconclusionwasthatthepigmentinterferesthedeterminationoftotaI saccharide.buthadeffectonthedeterminationoftheresiduaIsaccharideinthesupernatant.andthe determinationofsaccharidecontentwiththeDNSmethodwilInotbeaffectedbyethanoIindifferentratio. KeyWOrds:AureobasidiumpuIlulans:Pullulan;DNSmethod 中图分类号:TS201.23文献标识码:A文章编号:1002—0306(2008)02—0285—03 2006年5月l9日,国家卫生部发布了第8号公 告,普鲁兰多糖为新增四种食品添加剂产品之一, 它是出芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans)菌体分泌 的一种粘性胞外多糖.以d一1,6一糖苷键结合麦芽 糖构成同型多糖为主,即葡萄糖按d一1,4一糖苷键结 合成麦芽三糖,两端再以d一1,6一糖苷键同另#f-的麦 芽三糖结合,如此反复连接而成高分子多糖,在食 品,医药,轻工业生产等方面具有广泛的应用前景. 出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖,发酵液总糖,残糖 量是判断筛选菌株,优化发酵条件的重要指标,目前 DNS法是发酵液总糖及残糖测定的主要方法之一. 本文研究了出芽短梗霉发酵过程中产生的色素以及 不同比例乙醇对DNS法测定发酵液总糖,残糖含量 收稿日期:2007—07—23 作者简介:韩德权(1960一),男,高级工程师,硕士,研究方向:生物制 药,保健食品材料. 基金项目:哈尔滨市科技局2006年科技创新人才研究专项资金项目 (2006RFLXN032), 的影响,为出if-短梗霉发酵液糖含量的测定提供了 准确的依据. 1材料与方法 1.1材料与仪器 出芽短梗霉黑龙江大学生命科学学院微生物 实验室提供;3,5一二硝基水杨酸上海化学试剂采 购供应五联化工厂,含量≥98.0%;苯酚天津市东 丽区天大化学试剂厂,分析纯;亚硫酸钠浙江省永 嘉县化工试剂厂,分析纯;氢氧化钠天津市东丽区 天大化学试剂厂,含量≥96.0%