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第一章引言………………………………………………………………………….1
第一节沙门氏菌的研究现状……………………………………………………….1
1.1.1沙门氏菌的生物学特征及分类……………………………………………………………1
1.1.2多重抗药性沙门氏菌的威胁………………………………………………………………2
1.1.3沙门氏菌的致病性及致病机制……………………………………………………………2
1.1.4钴胺素在沙门氏菌中的合成…………………………………………………………….19
第二节高通量测序与转录组学…………………………………………………..23
1.2.1RNA.......................................................................................................................................:!—4.
1.2.2高通量测序技术………………………………………………………………………….24
第三节原核转录组研究现况……………………………………………………一29
1.3.1转录组研究方法………………………………………………………………………….30
1.3.2转录组的复杂性………………………………………………………………………….32
1.3.3宏转录组………………………………………………………………………………….37
第四节核酸结合蛋白FIS的研究背景……………………………………………39
1.4.1核酸结合蛋白…………………………………………………………………………….39
1.4.2
Fis蛋白…………………………………………………………………………………………………………………50
1.4.3Fis影响沙门氏菌与大肠杆菌的DNA超螺旋化…………………………………………52
1.4.4
Fis蛋白在转录调控中的作用…………………………………………………………….53
1.4.5
Fis蛋白在基因组上结合位点的研究进展……………………………………………….61
第五节本课题的研究内容及意义………………………………………………一66
第二章材料与方法………………………………………………………………..68
第一节实验材料…………………………………………………………………..68
2.1.1菌株与细胞株…………………………………………………………………………….68
2.1.2基因组与引物…………………………………………………………………………….69
2.1.3仪器和设备……………一:………………………………………………………………..76
2.1.4试剂及试剂盒…………………………………………………………………………….77
第二节实验方法………………………………………j………………………….80
2.2.1细菌培养………………………………………………………………………………….80
2.2.2基因克隆,敲除与插入………………………………………………………………….80
2.2.3RT-PCR.….….….….………..….…….….….….……………..……….….…….....…...................................£11
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2.2.4染色体免疫共沉淀(ChIP.Seq)样品制各………………………………………………82
2.2.5转录组测序样品制备…………………………………………………………………….82
2.2.6文库构建与测序………………………………………………………………………….84
2.2.7细胞侵染实验…………………………………………………………………………….84
2.2.8胶迁移实验……………………………………………………………………………….85
2.2.9预测的sRNA5’末端测定…………………………………………………………………86
2.2.10生物信息学分析…………
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