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单克隆抗体技术-动物检疫检验技术专业
动物检疫检验技术
专业教学资源库
单克隆抗体技术
目录
u基本概念
u杂交瘤技术的诞生及发展
u杂交瘤技术的原理
u杂交瘤技术的基本程序
u单克隆抗体的生产
《动物检疫检验技术专业教学资源库》
一、基本概念
l 多克隆抗体 (po lyc lona l ant ibody)
简称多抗,是针对多个不同抗原决定簇的抗体的混合物。
本页图片源自百度搜索
《动物检疫检验技术专业教学资源库》
l 单克隆抗体 (monoc lona l ant ibody)
简称单抗,是由一个B细胞克隆针对单一抗原决定簇产生
的抗体。
本页图片源自百度搜索
《动物检疫检验技术专业教学资源库》
本页图片源自百度搜索
《动物检疫检验技术专业教学资源库》
l 杂交瘤细胞系 (the hybridoma ce ll line)
既能像骨髓瘤细胞一样在体外培养中无限制增殖,又能像
脾淋巴细胞那样合成和分泌特异性抗体,通过克隆化得到
来自单个杂交瘤细胞的单克隆系,即杂交瘤细胞系。
本页图片源自百《度动搜物索检疫检验技术专业教学资源库》
二、杂交瘤技术的诞生及发展
u 杂交瘤技术的诞生
1975年8月7 日,Koher和M istein在英国 《自然》杂志上发表了题为 “
分泌具有预定特异性抗体的融合细胞的持续性培养”的著名论文,通
过骨髓瘤细胞与免疫绵羊红细胞的小鼠脾细胞融合,最终获得了很多
能分泌抗绵羊红细胞抗体的克隆化杂交瘤细胞系。
u 发展
融合剂:聚乙二醇 (PEG)
建立的骨髓瘤细胞系:SP2/0-Ag14,X63-G8653,NSO/1等,后来又建
立了大鼠、人和鸡等的骨髓瘤细胞系。
《动物检疫检验技术专业教学资源库》
三、杂交瘤技术的原理
选择性培养基
HAT
本《页动图物片检源疫自检百验度技搜术索专业教学资源库》
融合后形成的细胞种类
细胞种类 选择性培养基 HGPRT 细胞生长状态
脾细胞+骨髓瘤细胞 + 长期生长
脾细胞+脾细胞 + 短期生长
骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞 HAT 不能生长
-
脾细胞 + 短期生长
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