采用加速溶剂萃取（ASE）技术同时提取鱼肉组织中油脂和.PDFVIP

戴安公司技术注解 AN337 采用加速溶剂萃取（ASE ）技术同时提取鱼肉组织中的油脂和多氯联苯 介绍 鱼以及其它海洋生物体中的多氯联苯（PCBs）是环境保护者和官方机构的关注焦点。检测指示 鱼受污染程度的 PCB 以及作为生理状态指标的脂肪前，必须先从鱼组织中提取这些目标分析物。一 般采用索氏提取，然而索氏提取既耗时又需要大量的有机溶剂。本应用文献中介绍了采用 ASE 在 20min 内快速、有效地提取脂肪和PCB，而且仅消耗40mL 的溶剂。 ASE 是使用常用的液态溶剂在加温、加压下自动萃取的技术。ASE 萃取温度高于溶剂在常压下 的沸点。高温可增加溶剂的穿透力而高压能使溶剂保持液态。 开发ASE 方法时发现鱼肉组织中的水（＞70% ）可充当极性溶剂，得到的共萃取物会使得分析 前的样品净化变复杂。然而研究结果表明如果在ASE 萃取前干燥样品可消除共萃取物的干扰。样品 可在传统的烘箱里干燥或者与硅藻土混合后放置在微波炉里快速干燥。在本应用文献中给出详细的萃 取参数同时亦比较了ASE 与索氏萃取结果。 仪器 Dionex ASE200 加速溶剂萃取仪 （带有33mL 萃取池） Dionex ASE 溶剂控制器(可选) ASE 自动控制软件（可选） 带电子俘获检测器的HP5890 气相色谱 Restek RTX-5 色谱柱（30m×0.32mm，膜厚0.25μm） 微波炉（800 W ） 分析天平 Dionex 40ml 萃取收集瓶（P/N 055442） Organomation N-EVAP@分析蒸发器（型号112） 带螺纹的不锈钢漏斗（P/N 049288） 纤维素滤膜导入工具（P/N 049495） 纤维素滤膜（P/N 049458） 试剂及标准溶液 正己烷（优级纯，Fisher Scientific） 硅藻土 (J. T. Baker, Inc.) PCB AroclorTM标准（Chem Service） 硫酸（ACS 级，Fisher Scientific） 实验条件 加速溶剂萃取条件 溶剂：正已烷 系统压力：10Mpa （1500psi） 温度： 125 ℃ 样品量： 10g 加热时间： 6min 静态时间： 5min 静态循环次数：2 次 冲洗体积： 60 ％的萃取池体积 N2 吹扫时间： 以1MPa （150psi）的压力吹扫60 秒 戴安公司技术注解 AN337 溶剂总量： 40mL 总萃取时间： 20min GC 分析条件 色谱柱：RTX-5 载气：He （16psi） 检测器：电子俘获检测器 温度：300℃ 升温程序：100℃，保持2min ；100~160℃，速率15℃/min ；160~270℃，速率5℃/min 。 进样口温度：225℃ 样品制备 以下是高效萃取鱼肉组织中脂肪和多氯联苯的步骤。鱼肉中的脂肪含量因种类或其它的因素不同 而有所差异。因而样品所需的干燥时间亦不同。 准备萃取池 用专用的工具将纤维素滤膜放入33-mL 的萃取池中。 全鱼以及鱼片样品的制备 将放置在250mL 烧杯内的 10g 鱼肉组织与5g 硅藻土混合均匀。将混合物转移到称量皿中。将 称量皿置于微波炉内干燥 2.5min 。干燥时间取决于特定鱼组织样品的湿度和脂肪含量。一般可同时 干燥4 个样品。 用不锈钢抹刀以及带螺纹的不锈钢漏斗将干燥的样品转移到萃取池中。 分析结果与讨论 重量法测定脂肪 萃取液放置在N-EVAP 蒸发器的40mL 浓缩瓶中浓缩至10mL。在分析天平里放置铝制称量盘。 在铝制称量盘里滴入 1mL 浓缩萃取液，然后放在微波炉里 100℃±5℃下干燥5 分钟。称量盘冷却后 再次称量。残余的浓缩液可用来分析 PCB 的含量（如下所示）。ASE 与索氏萃取脂肪含量的结果对 比如表1 和表2 所示。 表1 索氏以及ASE 萃取低脂肪含量的鱼肉组织结果比较