诊断试剂位移及其在结构测定中的意义.PPTVIP

第五章 黄酮类化合物 Flavonoids 第一节 概述 第二节 理化性质及显色反应 第三节 提取与分离 第四节 检识与结构测定 第五节 结构研究中应注意的问题 第四节 检识与结构鉴定 色谱法、化学法、波谱法的综合运用 一、色谱法 二、UV 三、1H-NMR 四、13C-NMR 五、MS 一、色谱法在黄酮类结构确定中的应用 PC 应用范围：适合于检识各种类型黄酮类化合物，包括苷 与苷元。 双向色谱:检识植物粗提物中黄酮类化合物存在的最好方 法之一。用于分离黄酮类及其苷的混合物。 第一向：醇性展开剂：n-BuOH-HAc-H2O(4:1:5上层，BAW) t-BuOH-HAc-H2O(3:1:1,TBA) 水饱和的n-BuOH等； 第二向：水或水性展开剂： 2%～6% HAc 3%NaCl HAc-浓HCl-H2O（30：3：10） 一、色谱法在黄酮类结构确定中的应用 PC 检识黄酮类苷元：一般用“醇性”展开剂 检识黄酮苷：一般用“水性”展开剂。 检 视：UV / 氨熏色变 / 2%AlCl3 一、色谱法在黄酮类结构确定中的应用 Rf与黄酮类化合物结构的关系： （1）水性溶剂展开时，平面型分子几乎停留原点不动(Rf＜0.02)；非平面型分子因亲水性较强，Rf值较大（0.1～0.3）。 （2）醇性溶剂展开时，同一类型苷元，羟基越多，Rf值越小，即Rf值依次为：苷元 （Rf＞0.7） 单糖苷 双糖苷。 （3）醇性溶剂展开时，羟基被甲氧基取代，因极性减小，Rf值将增大。 一、色谱法在黄酮类结构确定中的应用 Rf与黄酮类化合物结构的关系： （4）醇性溶剂展开时，如黄酮类化合物羟基被苷化，因极性增大，Rf值将下降。 （5）大多数黄酮类化合物在纸色谱上用紫外光灯检查时，可以看到有色斑点，以氨蒸汽处理后常产生明显的颜色变化。 附：黄酮与黄酮醇的斑点颜色变化 一、色谱法在黄酮类化合物结构确定中的应用 PC 应用：不同结构类型黄酮，在不同展开系统中Rf值不同 醇性展开剂BAW 苷元 ＞单糖苷 ＞双糖苷 Rf 0.7 Rf 0.7 2%-8% HAc、3%NaCl 苷元 单糖苷 双糖苷 Rf ≈ 0 Rf 〉 0.5 3%-5%HAc 游离黄酮（醇）、查尔酮 Rf 0.02 游离二氢黄酮（醇）、二氢查尔酮 Rf 在 0.1-0.3 一、色谱法在黄酮类化合物结构确定中的应用 硅胶TLC（分离与鉴定弱极性黄酮类化合物） 黄酮苷元展开系统： 甲苯-甲酸甲酯-甲酸（5：4：1）——常用 苯-甲醇 （95：5） 苯-甲醇-醋酸（35：5：5） 氯仿-甲醇（85：15， 70：5） 甲苯-氯仿-丙酮（40：25：35） 丁醇-吡啶-甲酸 （40：10：2） 黄酮衍生物（甲醚化或乙酰化）展开系统 苯-丙酮（9：1） 苯-乙酸乙酯（75：25） 一、色谱法在黄酮类化合物结构确定中的应用 聚酰胺TLC(特别适合于分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类） 常用展开剂：乙醇-水（3:2） 水-乙醇-乙酰丙酮（4:2:1) 水-乙醇-甲酸-乙酰丙酮（5:1.5:1:0.5） 水饱和的正丁醇-醋酸（100:1，100:2） 丙酮-水（1:1） 丙酮-95%乙醇-水（2:1:2） 95%乙醇-醋酸（100:2） 苯-甲醇-丁酮（60:20:20） 第四节 检识与结构鉴定 色谱法、化学法、波谱法的综合运用 一、色谱法 二、UV 三、1H-NMR 四、13C-NMR 五、MS 二、UV在黄酮类化合物鉴定中的应用 一般程序： ① 测定样品在甲醇溶液中的UV光谱； ② 在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后， 测紫外可见光谱； ※ 常用的诊断试剂：