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- 2018-09-19 发布于河北
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实验一绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数
实验一 绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数
实验目的
通过紫外吸收光谱的绘制和摩尔吸光系数的测定,掌握Agilent8453 UV-Vis的使用方法。
学习导数光谱计算方法及特点。
实验原理
本实验用Agilent8453型分光光度计绘制氨基酸(苯丙氨酸,色氨酸 )的紫外吸收光谱,找出它的吸收峰波长并计算摩尔吸光系数。
苯丙氨酸 色氨酸
紫外分光光度法是利用物质对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法,波长范围为200-400nm的紫外光谱。
各种分子都有其特征的吸收光谱,即吸光度与摩尔吸光系数随波长的变化而变化的规律。吸收光谱的形状与物质的特征有关,以此进行定性分析。
为了清楚地描述各种物质对紫外区域电磁辐射的选择性吸收的情况,往往需绘制吸收光谱曲线,即吸光度对波长的曲线。在吸收光谱曲线上可以找到最大吸收峰波长。
根据比尔定律:
A = εb c
式中A—吸光度
ε—摩尔吸光系数
b—液槽厚度,单位:cm
c—摩尔浓度,单位:mol/l
摩尔吸光系数可按下式计算:
导数分光光度法:利用紫外-可见分光光度计软件系统带有的数学处理功能,对吸收光谱进行处理,可以获得导数光谱。利用导数光谱进行分光光度测定,称为导数分光光度法。通常
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