免疫共沉淀联合质谱分析筛选与HCMVIE86相互作用蛋白.PDFVIP

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免疫共沉淀联合质谱分析筛选与HCMVIE86相互作用蛋白

第 卷 第 期 , 54   1 ( ) Vol.54 No.1 青 岛 大 学 学 报 医 学 版 年 月 ( ) 2018 2 Februar 2018 JOURNALOFQINGDAOUNIVERSITY MEDICALSCIENCES y : / doi10.11712 ms201801001 j 论著 免疫共沉淀联合质谱分析筛选与 HCMVIE86 相互作用蛋白 , , , 李朝华 胡明 钱冬萌 王斌 ( , ) 青岛大学基础医学院病原生物学系 山东 青岛 266071 [ ] , 摘要 目的 利用免疫共沉淀联合质谱分析的方法 在人胚肺成纤维细胞系 细胞和胶质瘤细胞系     MRCG5 , ( ) . U87MG细胞中 筛选与人巨细胞病毒 HCMV 即刻早期蛋白IE86相互作用的病毒蛋白和剪接相关蛋白 方法 , , 通过 HCMV感染细胞使 IE86蛋白在细胞中表达 采用免疫共沉淀的方法富集两种细胞系中的 IE86结合蛋白 , , 凝胶电泳分离免疫共沉淀复合物 从胶中切取 结合蛋白条带 胶内酶解后进行液相色谱 质谱联 SDSGPAGE IE86 G , . , , 用分析及数据库检索 筛选与 相互作用蛋白 结果 利用免疫共沉淀联合质谱分析 在 细胞中 共鉴 IE86   MRCG5 , ; , 定到与 相互作用的病毒编码的蛋白质 种 宿主细胞编码的剪接相关蛋白 种 在 细胞中 共鉴定 IE86 17

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