生物选修三 学案 12基因工程的基本操作技术.doc

选修三学案2： 1.2 基因工程的基本操作程序（第一课时） 李姮 2012.02.08 学习目标 1.记住基因工程的四个基本操作步骤 2.能说出基因文库、基因组文库、部分基因库的概念 3.记住目的基因的获取方法；能说出PCR技术的原理、过程 4.记住基因表达载体的构建目的，一个基因表达载体的组成部分 5.知道启动子和终止子的存在位置及作用 学习重/难点 （1）从基因文库中获取目的基因 （2）利用PCR技术扩增目的基因 知识回顾：补充回顾原核生物及真核生物的基因结构等知识。 学习过程 基因工程的操作步骤 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 、 、 、 。 其中基因工程的核心是 。 一、目的基因的获取： 1．目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 。 2．获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因 ①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导入受体菌的群体中 ，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因组文库：含有一种生物的 基因 ②种类 CDNA文库：含有一种生物的 基因 ③目的基因的获取 根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。 （2）利用PCR技术扩增目的基因。 ①PCR：是一项在生物体外 特定DNA片段的核酸合成技术。 ②条件：已知目的基因的 序列。 ③过程：目的基因DNA受热形成 ，与 结合，然后在 ______的作用下进行延伸形成DNA。 ④方式：指数扩增=2n（n为扩增循环的次数） （3）人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。 例1、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是 A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高 二、基因表达载体的构建 （1）表达载体的组成：目的基因+ + +标记基因等。 （2）启动子：位于基因的 ，它是 结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。 （3）终止子：位于基因的 ，终止 。 （4）表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且 给下一代；使目的基因能够 和发挥作用。 （5）标记基因： 受体细胞是否含有目的基因。 （6）不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。 例2、哪项不是基因表达载体的组成部分 A．启动子 B．终止密码 C．标记基因 D．目的基因 六、巩固性练习 1、在遗传工程技术中，限制性内切酶主要用于 （　 　） A．目的基因的提取和导入 B．目的基因的导入和检测C．目的基因与运载体结合和导入 D．目的基因的提取和与运载体结合 2. 构建基因组DNA文库时，首先要分离细胞的（??? ） A. 染色体DNA?? ? B. 线粒体DNA?? C. 总mRNA?? ??? D. tRNA?? 3 在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌岭脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（??? ） A. 540个??????? B. 8100个 ?? C. 17280个????? D. 7560个 4.在基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是（??? ） A.结构简单，操作方便B.遗传物质含量少C.繁殖速度快D.性状稳定，变异少 5.基因工程的操作步骤：① 使目的基因与运载体相结合，② 将目的基因导入受体细胞，③ 检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④ 提取目的基因，正确的操作顺序是（??? ） 　A. ③②④① 　　B. ②④①③ 　C. ④①②③ 　D. ③④①② 6、下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A．基因工程经常以抗菌素抗性