γ-分泌酶抑制剂对高氧暴露致新生鼠脑白质损伤保护作用.PDFVIP

J South Med Univ, 2015, 35(9): 1287-1292 doi 10.3969/j.issn. 1673-4254.2015.09.13 ·1287 · 基础研究 γγ--分泌酶抑制剂分泌酶抑制剂对高氧暴露致新生鼠脑白质损伤的保护作用对高氧暴露致新生鼠脑白质损伤的保护作用 1 2 1 1 刘光建 ，蒋 朴 ，杜 敏 ，徐 颖 1重庆医科大学附属儿童医院麻醉科，儿童发育疾病研究教育部重点实验室，儿科学重庆市重点实验室，重庆市儿童发育 2 重大疾病诊治与预防国际科技合作基地，重庆 400014 ； 重庆医科大学基础医学院法医学教研室，重庆 400016 摘要：目的探讨γ-分泌酶抑制剂（N-[N-(3, 5-difluorophenacetyl)-l-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester, DAPT）对常压高浓度氧 暴露致新生小鼠脑白质损伤中的作用。方法 将新生3 d 小鼠持续80%高氧暴露48 h ，建立新生鼠未成熟高氧脑损伤模型，并于 高氧暴露前1 h 通过腹腔注射DAPT （10 mg/kg），将小鼠分为空气对照组（C），空气+DAPT 组（C+DAPT），高氧组（H），高氧+ DAPT 组（H+DAPT）。检测第3 ，5、12及28 天各组小鼠的脑质量、体质量；模型制作后48 h RT-PCR 检测小鼠脑组织NICD mRNA （Notch intracellular domain ）的表达；第12天免疫组化检测NG2 和MBP （myelin basic protein）表达；第28 天Morris 水迷 宫评价各组小鼠学习记忆能力。结果与C 组比较，H 组小鼠随着日龄延长小鼠脑质量、体质量均明显下降（P0.05）；与H 组比 较，给予DAPT 预处理高氧暴露（H+DAPT 组）后，小鼠脑质量、体质量显著增加（P0.05）；RT-PCR 提示高氧暴露后NICD mRNA 表达上调，DAPT 可逆转高氧所致脑组织中NICD 上调；免疫荧光双标显示H 组NG2 细胞增多，MBP 细胞减少；与H 组比 较，DAPT 预处理后（H+DAPT 组）NG2 细胞明显减少，MBP 细胞明显增多；Morris 水迷宫H 组与C组比较，逃避潜伏期和游动距 离均延长（P0.05），目标象限停留时间缩短（P0.05），穿越虚拟平台次数减少（P0.05）；而H+DAPT 组与H 组比较上述各项指 标均明显好转。结论 γ-分泌酶抑制剂（DAPT）可抑制高氧暴露所致脑内Notch 信号水平的变化，减轻高氧诱导未成熟脑白质损 伤，降低新生期高氧暴露对远期学习记忆能力损害。 关键词：DAPT ；Notch 信号通路；高氧；脑白质损伤；水迷宫 Effect of γ-secretase inhibitor on hyperoxia-induced brain white matter injury in mice 1 2 1 1 LIU Guangjian , JIANG Pu , DU Min , XU Ying 1Department of Anesthesiology, Children s Hospital of Chongqing Medical University, Ministry of Education Key Laboratory of Department Diseases in Childhood, Key Laboratory of Pediatrics in Chongqing, Chongqing International Science and Technology Cooperation Center for Child Development and Disorders, Chongqing 400014, China; 2Department of Forensic Med