11基因工程__dna重组技术的基本工具_xxxx1123.pptVIP

一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” 1、简称： 2、来源： ?? 一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” ?? 3、作用： 一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” ?? 4、识别特点： 一、限制性核酸内切酶 ——“分子手术刀” ?? 4、作用结果： 工具1：限制性核酸内切酶 * 同课异构教学展示活动 五年二班 2013年11月19日 基因工程的产物 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 基因工程的概念 结果 实质 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的概念 回顾： 定向改造生物性状，获得人类需要的基因产物 普通棉花　　 抗虫棉 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫基因) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与棉花DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 转基因棉花植株 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ “分子手术刀”—— 准确切割DNA 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三： 把抗虫基因导入棉花细胞 “分子缝合针”—— 将DNA片段再连接起来 “分子运输车”—— 将体外重组好的DNA导入受体细胞 “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三： 抗虫基因进入棉花细胞 “分子缝合针”—— DNA连接酶 “分子运输车”—— 运载体 1.1DNA重组技术的基本工具 1 .1、DNA重组技术的基本工具 “分子手术刀”-- “分子缝合针”-- “分子运输车”-- 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 运载体 主要从原核生物中 分离纯化出来的。 限制酶 你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是是什么吗？ 脱氧核苷酸的结构 G 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ A 3’,5’-磷酸二酯键 磷酸二酯键 切割DNA，使磷酸二酯键断开 磷酸二酯键 识别特定的核苷酸序列，切割特定切点， 具有专一性 产生黏性未端和平末端 ?? 3、特点: ?? 4、作用： 5、结果： 1、简称： 2、来源： 主要在原核生物中 限制酶 识别特定核苷酸序列, 切割特定切点 （专一性） 切割DNA 产生黏性未端或平末端 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？ 要切两个切口，产生四个黏性(平)末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性(平)末端，然后让两者的黏性(平)末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 思考? 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 同种限制酶切割 1、作用: 把DNA片段拼接成新的DNA， 2、作用原理： 催化磷酸二酯键形成,不是氢键 二、 DNA连接酶 ——“分子缝合针” 3、类型： 类型 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 功能 大肠杆菌 T4噬菌体 只能连接黏性末端 能连接黏性末端和 平末端 两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来 DNA连接酶的缝合作用 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， 注意：DNA连接酶可连接双链DNA中的DNA单链缺口，但不能连接单链DNA！ A A T T G C A A T T A A T DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶的作用 返回 *