分光光度法检测蛋白质含量.pptVIP

1．取试管3支，编号按下表操作 试 剂（ml） 空白 标准 标本 生理盐水 0.1 蛋白标准液(50ug／ml) 0.1 样 品 0.1 考马斯亮蓝试剂 5.0 5.0 5.0 2.混匀，放置5分钟，在波长595nm处，以空白管调“0”，测 定各管的吸光度。 【操作步骤】 3. 计算 A标本/A标准 ×50 （μg/ml） = 样品中蛋白质的含量（μg/ml） 注意：蛋白标准液浓度50 μg/ml 实验四 紫外分光光度法测定蛋白质含量 【基本原理】 由于蛋白质分子中含有酪氨酸，色氨酸等芳香族氨基酸，因而蛋白质具有吸收紫外光的性质，吸收高峰在280nm波长处。由于各种蛋白质所含芳香族氨基酸的量相差很少，因此在此波长范围内，吸收峰的光密度值与其浓度成正比关系，可作定量测定。 灵敏度：50-100μg 【操作步骤】 （一）制作标准曲线 1.取试管6支，编号，按下表操作。