银杏叶有效成分纯化工艺--毕业论文设计.docVIP

本科生学士学位论文 题 目: 银杏叶有效成分纯化工艺 姓 名: 学 院: 理学院 专 业: 高分子材料与工程 指导教师: 职称: 教授 2011年 5月21日 摘要 银杏是我国的特有树种。银杏叶的药用价值很高,其中含有的总黄酮包括 ：银杏双黄酮 、黄酮甙元、槲皮素、山奈黄素 和异鼠李黄素等多种成分。银杏双黄酮能降低血清胆甾醇，对高血压患者有降压作 用，可用于治疗冠心病、心绞痛和脑血管疾患等多种 疾病； 黄酮甙元有降低血液胆固醇的作用。从银杏叶中提取的槲皮素、山奈黄素、异鼠李黄素的混合物，具有扩张血管及解除痉挛的作用 ，对冠心病、心绞痛 等也有疗效；银杏叶中还含有银杏内脂 A、B 、C、M 等成分，可用于治疗脑病、脊髓病和脑水肿性的神经 障碍等疾病，并能改善多种休克病人的症状。目前，国内外均已生产出多种银杏叶制剂，广泛 用于心脑血管疾病的治疗。但据了解，目前市场上所 见的银杏叶制剂大多有效成分含量偏低 ，疗效不显著，使患者服用量大，服用次数多、不方便，而且费用偏高。银杏叶制剂的有效成分主要是银杏叶黄酮和内脂，其提取 较困难，国内外使用最广泛的提取方法是树脂吸附纯化法，该法的提取率最高只能得到银杏 叶含黄酮苷的27.4 ％和银杏叶总内酯 10.6 ％。 本次毕业设计，我们尝试用大孔树脂吸附分离的方法，寻找一种简单的分离方法，从而纯化银杏叶提取物，然后用高效液相色谱表征用以讨论我们实验结果。 标准曲线的测定 在高效液相色谱中，每种物质都有其特定的出峰时间，而其峰面积则对应着注射的液体中提取物的含量，所以只要我们用以单一的标准样品进行高效液相的测定，所得的出峰时间和峰面积，就可以直接用于我们以后提取物得标定和对比。 材料和方法 高效液相色谱仪；标准样品的：槲皮素，异鼠李素，山奈酸素。甲醇，色谱级磷酸，去离子水溶剂 黄酮含量测定 1 色谱条件色谱柱 ：高效液相色谱C l 8 柱，流动相 ： 1 0mmol/L磷酸盐缓冲液 ( PH 2.5)一甲醇( 5 0：5 0 ) ， 流速： 1.0 m l /m i n ， 紫外检测波长 ： 3 6 0 n m。 用外标法定量， 进样量 1 0ul。 2 ． 对照品溶液的制备： 精密称取槲皮素,山柰素和异鼠李素适量,分别加甲醇溶解,配成 100ug/m l的对照品贮备溶液。依次用 H P L C流动相稀释成含槲皮素、山奈酸素，异鼠李素0.25-0.5-1-2-4-6-8 ~ u g/ml的系列对照品溶液。 3 ． 供试品溶液的制备 ：准 确称取银杏提取 物2 0 m g ， 置于 l 5 m l 硬质玻璃螺 E l 试管，加甲醇 一 4 mol/L盐酸( 7 ： 3 ) 水解液1 0 ml ，加盖 ，放人 8 0 ~ C恒温水浴槽内，水解 l h 。吸取 1 0 0 l x l 该液体,用 6 0 ％甲醇定容至5 m l 棕色容量瓶中，作为供试液。 黄酮含量标准曲线 线性关系：取黄酮系列对照品溶液，按色谱条件进行测定，以峰面积mAU对进样量( ug ) 进行回归，得出回归曲线。 异鼠李素：准确配置标准样品，分别配成8—6—4—2—1ug/ml的溶剂，用滤膜过滤后等待做液相。 每一组浓度的样品分别做3组平行样，然后取其平均值，对应出峰面积，下面是我们本次异鼠李素的实验数据： 含量ug/ml 出峰时间min 面积Mau 　 　 　 8 21.85 400 　 23.864 414 　 21.368 457 　 22423.66667 6 29 312 　 25 378 　 28.646 385 　 27358.33333 4 31.331 273 　 23.449 234 　 30.386 225 　 28244 2 16.67 116 　 20.204 116 　 23 123 　 19.958 118.33333 含量ug/ml 面积Mau 　 　 8 423 6 358 4 244 2 118 统计总结的含量和面积如下 得出的标准曲线如下 异鼠李素的实验标定讨论：在1ug/ml 0.5ug/ml 0.25ug/ml 中我们虽然可以看到明显的出峰，但是含量太低 异鼠李素的保留时间：24.295Min 含量ug