《第五章蛋白多肽类药物》教学课件.pptVIP

组织或细胞的破碎 机械法 工业上常用的有绞肉机，刨胰机，球磨机、磨粉机。实验室常用的有匀浆机，研钵，高速组织捣碎机。 物理法 压榨法、高压法和减压法，渗透压法；超声波法；反复冻融法。 化学法 用稀酸、稀碱、浓盐、有机溶剂或表面活性剂处理细胞，可破坏细胞结构释放出内容物。 酶解法 用外来酶处理生物材料。 利用制备目的物的溶解特性，将目的物与细胞的固形物成分或其它结合成分分离，使其由固相转入液相或从细胞生理状态转入特定溶液环境的过程。 提取 影响提取收率的因素 温度 酸碱度 溶剂 离子强度 表面活性剂 盐析浓缩 有机溶剂沉淀浓缩 葡聚糖凝胶（Sephadex）浓缩 聚乙二醇透析浓缩 超滤浓缩 真空减压浓缩与薄膜浓缩 蛋白质溶液的浓缩方法 人促红细胞生成素是由166个或基酸残基组成的糖蛋白激素。其分子量为21.3KD，水解并除去27个疏水氨基酸肽段后得到分子量18.4KD的激素。基因工程生产的hEPO分子量为23KD，比天然产物大，说明有少量低聚糖化。 第三节 多肽药物的制备 作用与用途 促红细胞生成素主要由肾脏分泌，也可由巨噬细胞或其他细胞产生，具有刺激活体内增生红细胞的功能。 表皮细胞生长因子 1962年从中提取出一种多肽能直接刺激表皮的生长和角化，故命名为表皮生长因子。 hEGF分子量为6.2KD,等电点 pH4.5 。 作用与用途 EGF能促进细胞的增殖;实验证明EGF对体外培养的细胞的增殖刺激作用不限于上皮细胞，其作用是广谱的。 谢谢使用！ * 浓度 * 单克隆抗体是将抗体产生细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的。单克隆抗体具有高度特异性、均一性、来源稳定、可大量生产等特点，为抗体制备和应用提供了全新的手段，还促进了基础和临床医学的发展。 基因工程是基因分子水平上的遗传工程，基因工程技术的突出优越性在于能定向的人工的改造生物遗传性状的育种新技术。 * 生理活性物质易失活与降解，采集时必须保持材料的新鲜。防止腐败、变质与微生物污染。如胰脏采摘后要立即速冻，防止胰岛素活力下降。???????? 保存生物材料的主要方法有速冻、冻干、有机溶剂脱水，制成丙酮粉，或浸存于丙酮与甘油中等。 * 动物组织/植物种子/叶片等一般使用高速组织到捣碎机；植物细胞具有坚硬的细胞壁，一般先用纤维素酶处理，细菌细胞先用溶菌酶处理，然后用超声波振荡/高速挤压或冻融交替等方法破碎。 * 生理活性物质易失活与降解，采集时必须保持材料的新鲜。防止腐败、变质与微生物污染。如胰脏采摘后要立即速冻，防止胰岛素活力下降。???????? 保存生物材料的主要方法有速冻、冻干、有机溶剂脱水，制成丙酮粉，或浸存于丙酮与甘油中等。 第五章 多肽、蛋白质类药物 自1953年人工合成了第一个有生物活性的多肽 催产素以后，20世纪50年代都集中于脑垂体所分泌的各种多肽激素的研究。 60年代，研究的重点转移到控制脑垂体激素分泌的各种多肽激素的研究。 70年代，神经肽的研究进入高潮。生物胚层的发育渊源关系表明，很多脑活性肽也存在于肠胃组织中，从而推动了肠胃激素研究的进展。 1 多肽及蛋白质类药物的性质与作用 多肽、蛋白质类药物分类 按来源分 生化药物 来源于动植物有机体 基因工程药物 来源于基因工程菌表达生产的药物 习惯分法 多肽生化药物、细胞生长因子、抗体药物、抗菌肽、酶类药物 多肽类激素、多肽抗生素：消化道多肽、下丘脑多肽、脑多肽、激肽等；动、植物蛋白。酶类与辅酶类药物：蛋白水解酶类、凝血酶及抗栓酶，辅酶Q10等。 生化药物 激素类及神经递质类药物：人生长激素释放抑制因子，人胰岛素，人生长激素细胞因子类药物：人干扰素，人白细胞介素，集落刺激因子，促红细胞生成素酶类及凝血因子类药物：单克隆抗体、疫苗、基因治疗药物、白介素、生长因子、内啡肽、反义药物、人生长激素、促红细胞生成素、肿瘤坏死因子等。 基因工程药物 一 多肽类生化药物 多肽类药物（多肽类激素）是机体的特定腺体合成并释放的一种物质，通过与远程敏感细胞内或细胞表面的受体相互作用而使靶细胞发生变化。 主要包括垂体多肽激素、下丘脑多肽激素、甲状腺多肽激素、胰岛多肽激素、肠胃道多肽激素和 胸腺多肽激素等。 多肽类生化药物功能特性 调节各种各样的生理活动和生化反应； 生物活性高； 分子小