Rh(D)血型鉴定操作规程.docVIP

成都市青白江区人民医院 对象：全院职工 医疗药事制度 文件名称：Rh（D）血型鉴定 编写日期：2014.1 修订日期：2017.4 执行日期：2017.4 注：①本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印②本文件最终解释权归输血科 Rh（D）血型鉴定 【原理】Rh血型系统是输血医学中仅次于ABO系统的第二大血型系统。Rh血型系统常见的抗原有D和C、c、E、e五种，分别由RHD基因和RHCE基因编码，RhD和RhCE蛋白均是反复穿膜的蛋白质。使用相应的抗D、抗C、抗c、抗E、抗e五种血型试剂可以鉴定这些抗原。临床上，D抗原是Rh抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有临床意义的抗原，一般只做D抗原鉴定，凡带有D抗原者称为Rh阳性，不带D抗原者称为Rh阴性。 试管法 【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于Rh鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中，也可以洗涤后悬浮于盐水中。 【试剂】 IgM抗D试剂 Rh对照试剂 【操作】 加1滴抗D到一洁净试管，并做好标记 加1滴Rh对照试剂到第二个洁净试管中，并做好标记 分别加1滴2%～5%红细胞悬液到每支试管中 轻轻混匀，通常（900～100）×g离心15秒 轻轻重悬细胞扣，检查凝集 评价反应强度，记录试验管和对照管得试验结果 【结果判定】 抗D管凝集，对照管不凝集表明红细胞是RhD阳性 对照管和抗D管均阴性，说明待测红细胞是RhD阴性结果 对照管凝集则试验无效 2.玻片法 【样本】用玻片法进行RhD定型时，待检红细胞悬液的浓度是40%～50% 【试剂】适合用于玻片法的低蛋白抗D试剂 【操作】 加1滴抗D到一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记 加1滴适合的对照试剂到另一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记 向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一种试剂中分别加1滴混匀的40%～50%待检红细胞悬液 充分混合抗体试剂和细胞，用搅拌棒将混合物均匀分散 不断地从一边到另一边轻轻倾斜转动玻片或白瓷板，持续大概2分钟 读取，解释并记录所有玻片或白瓷板凹孔中的结果 【结果判定】 抗D试剂与红细胞反应表现凝集，而对照为阴性反应，表明待检红细胞为RhD阳性 抗D试剂与对照均为阴性反应，表明待检红细胞为RhD阴性 对照管凝集则试验无效 【注意事项】玻片法可能存在感染性标本暴露的风险，需要注意防范；玻片法不适用于检测弱D表型 柱凝集法 【样本】同玻片法和试管法 【试剂】已加入抗D试剂的柱凝集血型卡 【操作】 配制好的检测样本的红细胞悬液和试剂红细胞悬液.通常配制为0.8%～1.0%浓度。 在专用微柱凝集卡的RhD检测管中加入样本红细胞悬液50ul 在专用血型血清学用离心机内离心 判读并记录凝集反应结果 【结果判定】根据红细胞在凝胶柱内的反应情况解释凝集强度。出现凝集和（或）溶血为阳性，不凝集为阴性 【参考文献】 中华人民共和国卫生部医政司编，全国临床检验操作规程（第四版）