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鱼腥草注射液与其药材挥发油相关组分分析 　　摘 要 利用GC-MS提供的二维化学数据信息，通过多组分波谱相关色谱方法及化学计量学分辨技术，对中试生产的鱼腥草注射液及其对应的药材挥发性成分进行比较和归属分析。结果表明，在药材和注射液图谱的40个峰族中，只有5个非相关峰族，即在药材制成成品注射液过程中，尽管大量组分出现了浓度消长的现象，但是成品注射液的绝大部分成分来自药材，其中仅有少数组分出现了消失和生成现象。 　　关键词 鱼腥草； 气相色谱-质谱； 多组分波谱相关色谱法； 挥发油； 相关组分 　　 　　1 引 言 　　鱼腥草注射液为鱼腥草经加工制成的灭菌水溶液，临床上广泛用于清热、解毒、利湿等[1,2]。2006年6月，因鱼腥草注射液出现注射不良反应，国家食品药品监督管理局宣布，在全国范围内暂停使用和审批鱼腥草注射液[3]。尽管随后启动了产品调查和再评价工作，但是系统的研究工作及相关的科学数据还很缺乏。本实验采用气相色谱-质谱（GC-MS）法分离检测中试生产的鱼腥草注射液和鱼腥草药材挥发油成分，采用多组分波谱相关色谱法（MSCC） [4]及化学计量学分辨方法对注射液与其药材挥发油成分的相关组分进行比较分析，对两者的色谱流出组分进行判断和归属分析，为中成药与药材中各组分的比较研究提供了方便且可行的分析方法，为鱼腥草注射液成分的归属提供基础研究数据。 　　2 实验部分 　　2.1 鱼腥草药材与供试品溶液的制备 　　鱼腥草药材采集于湖南省怀化市杨村鱼腥草种植基地实验园区，经怀化学院生物系鉴定。自然晾干16 d。将鱼腥草地上部分切碎（1.5～2.0 cm），按照中国药典2005版第一部附录XD挥发油测定法提取并收集挥发油，置4 ℃冰箱中保存备用。取20 　　。质谱检测器，电离方式EI，电离能量70 eV，质量范围20～450 U，扫描间隔：0.2 s/次。 　　3 理论分析 　　多组分波谱相关色谱方法主要用于分析两色谱峰簇的相关性[4,5]。联用色谱测定两个样品而得到相应的色谱图，即二维波谱色谱数据X、Y。子矩阵X??target为图谱X中的目标色谱峰（簇），子矩阵Y??test表示Y中的待测组分色谱峰簇。首先，对X??target进行奇异值分解，如式（1）所示，并从中提取各组成物质的波谱。 　　X ??target＝UpSpVpT＋E（1） 　　其中，Up和Vp分别表示得分矩阵和荷载矩阵，含有X??target的p个组分的色谱和波谱信息。Sp为对角阵，收集了X??target矩阵的特征值，表征了各组分在该色谱峰（簇）中的权重。E为误差，包含了实验和仪器误差。上标T表示矩阵的转置。 　　将荷载矩阵Vp定义为关键波谱矩阵，然后用其构建正交投影矩阵P, 　　P=I－VpVpT（2） 　　式中，I为单位矩阵，用正交投影矩阵P对二维图谱数据Y的每一色谱流出位置对应的波谱矢量yj进行投影运算， 　　yjop＝Pyj （j＝1, …, m,）（3） 　　式中，yjop为波谱yj的投影残差。 　　如果原始波谱yj与关键波谱矩阵Vp的波谱相关，则yjop为0矢量，对其求模后应为0，即： 　　rej＝||yjop||＝0（4） 　　然而，考虑到仪器背景噪声等因素，尤其是不等性噪声（Heteroscedastic noise）的影响[6～8]，波谱相关色谱方法以投影后所得的残差波谱yjop与投影前的原始波谱yj的内积（Inner-product coefficient）为判据，即 　　rj＝yjTyjop‖yj‖‖yjop‖ （j＝1, 2,…, m）（5） 　　rj（j＝1, …, m）的值为0≤rj≤1。再以rj对Y的色谱流出时间作图。根据此图判断图谱Y中是否存在与X??target相关的色谱峰（簇）。如果图谱Y中的色谱峰（簇） Y??test与X??target所含有的化学组分波谱相关，那么Y??test所在的色谱区间对应的rj等于零或接近于零。否则，rj等将远大于零。 　　4 结果与讨论 　　4.1 多组分光谱相关色谱用于药材与注射液重叠色谱峰的比较 　　图1为鱼腥草注射液和药材挥发油成分GC-MS总离子流图（TIC）。为了方便比较，将注射液的TIC画为负方向。根据联用仪器及工作站提供的色谱和波谱数据，只能对一些比较纯的色谱峰进行比较。但由于中药样品十分复杂，不可能使所有的组分都达到分离。因此对重叠色谱峰的比较和分析，需要借助化学计量学和计算机技术。以下讨论用波谱相关色谱方法对鱼腥草和注射液样品中的重叠色谱峰进行快速的比较 　　以图1中保留时间范围15.73～16.00 min的注射液样品的色谱峰簇Peak 6（图2a）和保留时间范围??15.69～16.00 min的鱼腥草药材样品的色谱峰簇