专家意见C左侧的胰腺组织胰岛素免疫荧光染色为何显着低于图.DOC

PAGE \* MERGEFORMAT 13 专家意见：图4C左侧的胰腺组织胰岛素免疫荧光染色为何显著低于图4E左侧的胰腺组织胰岛素免疫荧光染色，二者都是普食的 MIP-TF小鼠！ 回复： 谢谢专家的宝贵意见。这是因为2张图的放大倍数不同，图4C是10X，图4E是40X。 相应图标尺已经图中标出。 另外，先前的问题已经纠正： 材料与方法 四、小动物活体成像中第2自然段第2行“1.5mg/kg”已修正为“1.5g/kg”； 图4图例中“1型糖尿病”已修改为“糖尿病”。 利用小动物成像技术对小鼠胰岛β细胞容量在体非创评估 基金项目: 国家自然科学基金专项资金项目 作者单位：上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科，上海市糖尿病研究所，上海市糖尿病重点实验室，200233，上海 通讯作者：王琛 Email: wangchen@ 赵瑜，林紫薇，孙赟，慕开达，王琛*，贾伟平 作者单位：200233 上海，上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科，上海市糖尿病研究所，上海市糖尿病重点实验室 【摘要】目的 利用β细胞中携带有荧光素酶报告基因的转基因（MIP-TF）小鼠，并通过活体成像系统对该小鼠生理及病理状态下的β细胞容量进行在体评估，从而建立基于该小鼠、对β细胞进行在体追踪的小动物活体成像平台。方法 MIP-TF小鼠从美国Jackson Lab购置。葡萄糖耐量实验与葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验分别采用小鼠腹腔注射1.5g/kg, 3.0g/kg体重葡萄糖进行。45%高脂饮食（high fat diet, HFD）喂养MIP-TF小鼠制备饮食诱导的肥胖小鼠；200mg/kg 链脲佐菌素（stretozotoxin, STZ）腹腔注射制备小鼠糖尿病模型。胰腺胰岛素免疫荧光染色用于胰岛β细胞组织学检测，小动物活体成像检测MIP-TF小鼠胰岛β细胞容量。结果 MIP-TF转基因小鼠与同窝野生型小鼠糖耐量及胰岛素分泌水平无统计学差异；MIP-TF小鼠的活体成像中荧光信号位于小鼠胰腺区域，其荧光强度在小鼠注射葡萄糖后明显增加。MIP-TF小鼠在HFD喂养后体重增加，反映胰岛β细胞容量的荧光强度显著增强，是普食喂养小鼠的4倍；而小鼠注射STZ后活体成像荧光强度几乎完全消失。以上活体成像结果与胰岛素免疫荧光结果一致。结论 MIP-TF小鼠β细胞中特异性表达荧光素酶不影响小鼠发育及葡萄糖代谢。利用该小鼠进行活体胰岛β细胞容量检测特异性高、敏感性强。该小鼠可作为一种工具动物平台，应用于糖尿病模型中β细胞容量的动态检测。该项工作的开展为国内连续、动态的研究β细胞容量提供了新途径。 【关键词】胰岛素抵抗 ; 糖尿病; β细胞 ; 小动物活体成像 The in vivo non-invasive measurement of mouse pancreatic β cell mass through bioluminescence imaging technology ZHAO Yu, LIN Ziwei, SUN Yun, MU Kaida, WANG Chen*, JIA Weiping The Department of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Jiao Tong University Affiliated Sixth People’s Hospital; Shanghai Diabetes Institute; Shanghai Key Laboratory of Diabetes Mellitus, Shanghai 200233, China Corresponding author: WANG Chen, wangchen@ 【Abstract】Objective To evaluate the platform for measurement of pancreatic β cell mass through transgenic mice carrying luciferase reporter gene (MIP-TF) specific in β cells and non-invasive bioluminescence imaging technique. Methods MIP-TF mice were purchased from Jackson Lab. Glucose tolerance tests (GTT) and glucose-stimulated insulin secretion tests were conducted through glucose (1.5g / kg for GTTs, 3.0g / kg fo