HPLC紫外检测器日常的维护和故障排除.ppt

HPLC紫外检测器日常维护和故障排除 深圳市亿鑫仪器设备有限公司检测器日常的维护和故障排除--分析常见问题--仪器日常维护--仪器常见故障 分析常见问题 基线噪音 可能的原因： ﹠流通池脏 ﹠检测器灯有问题 ﹠如果是周期性的，电压或泵的脉冲 ﹠温度对检测器的影响 ﹠气泡经过检测器 Time (min.) 基线漂移 可能的原因： ﹠梯度洗脱 ﹠温度不稳定 (示差检测器） ﹠ 流动相中有污染物 ﹠柱中的流动相没有平衡 ﹠体系中有污染物流出 ﹠流通池的渗漏 液相色谱仪的日常维护 检测器 参比池 样品池 光线 检测器 故障：样品池受污 表现：样品池和参比池能量相差较大 检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPL EN和 REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。 措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重， 拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。 储液罐 ? 使用HPLC试剂/溶剂 ? 含缓冲盐的流动相过0.25μm膜除去微粒物质 ? 更换流动相时,应彻底清洗，防止交叉污染。 ? 定期清洁储液器及附件，防止长微生物 检测器（流通池） ? 保持清洁，每天用后与色谱柱一起清洗 ? 不定期用强溶剂反向冲洗检测器 ? 使用脱过气的流动相，防止气泡滞留池内 ? 检测器灯有一定寿命，平衡和清洗色谱柱时不要开灯。 流通池的清洗方法（尽量少用） ?断开所有的管路，把针泵接到流动池的出口 ?用10--20ml纯水冲洗流动池（要确认所用溶剂已洗干净） ?用10--20ml的20%硝酸冲洗流动池（可以适当停留30min左右） ?用30—40ml左右纯水冲洗 ?用10—20ml左右甲醇冲洗 ?用干净的气体吹干 常见故障及解决方法 发现问题 定位问题 纠正问题 防止问题的在发生 检测器紫外—可见光检测器 ?灯故障:基线噪声大,灵敏度低, ? 氘灯寿命:1000h ? 汞灯和钨灯寿命:2000h 一般使用6个月以上可能接近寿命期限,可以考虑更换新灯 检测器紫外—可见光检测器 ?流动池 ? 流动池内有气泡 用脱气甲醇，不同流量冲洗 ? 池堵塞（入口、出口、池内） 用可溶堵塞物的溶剂冲洗 （缓冲盐用水冲洗） ? 池污染 异丙醇、二氯甲烷、 6mol/L HNO3 冲洗 检测器紫外—可见光检测器 ?测量池和参比池失配 ? UV以空气为参比，一般不扣流动相本底 ? 若用有紫外吸收的流动相，参比信号不为零，会出现倒峰和伪峰。此时，选择合适的流动相。 检测器紫外—可见光检测器 ?时间常数选择：（过滤噪声） 有的仪器有固定的时间常数，有的需设置 时间常数。 ?时间常数太小, 噪声增大; ?时间常数太大,出现宽峰、拖尾或矮峰。 时间常数的设置一般根据经验估计，小颗粒 柱常数小，可选最窄峰宽的1/10作为时间常数, 对4.6×(150-250)mm，5um柱，可选0.5s or1s 检测器 非线性响应 ?超出线性范围 ?样品量太大 ?检测器的衰减超出了其线性动力学范围 ?流动相的紫外吸收比较强 检测器 温度影响 ? 环境温度变化引起基线漂移 ? 流动相温度变化引起折射率改变，紫外光传导变化 ? 柱温变化引起基线漂移 检测器信号线故障 ?记录仪和数据处理系统信号线插接不紧,接触不良，信号很弱，出现不需要的噪音,此时按说明书检查线路连接。 ?地线对仪器很重要, 仪器外壳和信号线的接地很严格，接地不良会出现较大的基线噪声，接错线会造成短路，烧毁仪器。 检测器 波长问题 ?次级发射效应：用氘灯作可见光范围的光源时会发生次级发射效应，用钨灯没有此影响. ?正确选择波长:既照顾到灵敏度,有考虑到稳定性 ?波长校准：机械转动光栅选择波长,因磨损造成所选波长与刻度盘上的不一致，而且重复性也差。可用波长溶液校准：235、257、315、350nm 。 深圳市亿鑫仪器设备有限公司