一、常用培养基和基本特性.PDFVIP

整体实验新概念，生命科学急先锋 目 录 一、常用培养基及基本特性1 二、HBSS的配制和使用攻略4 三、如何让支原体远离你的细胞6 四、细胞爬片用小玻片处理8 五、细胞培养基本实验操作9 六、一般培养试剂介绍13 七、污染是细胞培养的大敌17 八、细胞培养基础问答24 1 35 第 页 共 页 整体实验新概念，生命科学急先锋 常用培养基及基本特性 1 RPMI-1640Medium 、 RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交 瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、 HL-60 Jurkat Daudi IM-9 T HCT-15 、 、 、 等成淋巴细胞、 细胞淋巴瘤细胞以及 上皮细胞等 均可参考使用。 2 MinimumEssentialMedium MEM 、 （ ） 12 8 也称最低必需培养基，它仅含有 种必需氨基酸、谷氨酰胺和 种维生素。成分简 单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha 一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM 来培养。 3 DMEM- 、 高糖 （标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培 养更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克, 隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA 转染的转化细胞的培养。 4 DMEM- 、 低糖 （标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培 养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培 养。 5 DMEM/F12 、 DMEM/F12 F12 培养基适于克隆密度的培养。 培养基成分复杂，含有多种微量元素， DMEM 1 1 DMEM/F12 DME/F12medium 和 以 ： 结合，称为 培养基 （ ），作为开发无血 F12 DMEM 清配方的基础，以利用 含有较丰富的成分和 含有较高浓度的营养成分为优点。 该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力， DMEM/F12 1 1 15mMHEPES 改良之一是在 （： ）中加入 缓冲液。 6 McCoy s5A 、 ’ McCoy’s5AMedium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种 （如骨髓、皮肤、 肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活 检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen 大鼠肉瘤成纤 HT-29 BHL-100 维细胞、人淋巴细胞、 、 等上皮细胞。 7 Iscove’sModifiedDulbeccoMedium (IMDM) 、 Guilber Iscove Dulbecco