时间分辨荧光免疫层析法联合检测血清肿瘤标志物-中华医学会核医学.PDF

·２６６ · 中华核医学与分子影像杂志２０１８年４月第３８卷第４期　 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｉｍａｇｉｎｇ，Ａｐｒ． ２０１８，Ｖｏｌ． ３８，Ｎｏ．４ ·基础研究 · 时间分辨荧光免疫层析法联合检测 血清肿瘤标志物 郭明明　 肖华龙　 周剑波　 傅利新　 周彬　 张珏　 黄飚 ２１４０６３　 无锡，江苏省原子医学研究所、卫生部核医学重点实验室、江苏省分子核医学 重点实验室（郭明明、周彬、张珏、黄飚）；２１４０２３　 无锡市人民医院检验科（肖华龙）； ２１４４００　 江阴市人民医院检验科（周剑波）；２１４０６３　 无锡市江原实业技贸总公司（傅 利新） 通信作者：黄飚，Ｅｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｂｉａｏ＠ｊｓｉｎｍ．ｏｒｇ ＤＯＩ：１０．３７６０／ ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５⁃２８４８．２０１８．０４．００９ 【摘要】　 目的　 建立时间分辨荧光免疫层析法（ＴＲＦＭＩＡ）联合检测血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）和癌 胚抗原（ＣＥＡ）的反应体系，并对其进行评价。 方法　 以包裹有Ｅｕ螯合物的荧光微球作为标记物，共 ＃ ＃ ＃ 价偶联抗ＡＦＰ单克隆抗体（简称单抗）ＡＣ１８ 和ＣＥＡ单抗ＡＥ０３ ，将抗ＡＦＰ单抗ＡＣ１７ 、抗ＣＥＡ单抗 ＡＥ０５ 和羊抗兔ＩｇＧ抗体喷涂于硝酸纤维素膜上，作为检测线和质控线，制作免疫层析试纸条，确定＃ 检测方法线性范围、最低检测限等指标，并将该法与时间分辨荧光免疫法（ＴＲＦＩＡ）和电化学发光免 疫分析法（ＥＣＬＩＡ）进行直线相关分析。 结果　 标准曲线显示，ＡＦＰ可测范围为０．０７～１０００．００ ｋＵ／ Ｌ， 批内和批间ＣＶ分别为５．９３％和１１．０７％，平均回收率为９２．７７％；ＣＥＡ可测范围为０．１２～５００．００ μｇ／ Ｌ，批 内和批间ＣＶ分别为７．５３％和１２．１３％，平均回收率为９４．７３％。 ＴＲＦＭＩＡ与ＴＲＦＩＡ和ＥＣＬＩＡ检测的ＡＦＰ 和ＣＥＡ结果有较好的相关性，相关系数为０．９３～０．９７。 结论　 成功建立时间分辨荧光免疫层析试纸 联合检测法，可同时检测ＡＦＰ 和ＣＥＡ。 【关键词】　 甲胎蛋白类；癌胚抗原；荧光免疫测定；化学发光测定法 基金项目：江苏省科技支撑计划⁃社会发展（ＢＥ２０１４６０８） Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｍａｒｋｅｒｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ｕｓｉｎｇ ｔｉｍｅ⁃ｒｅｓｏｌｖｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍｉｃｒｏ⁃ ｓｐｈｅｒｅｓ ｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｓｓａｙ　 ＧｕｏＭｉｎｇｍｉｎｇ，Ｘｉａｏ Ｈｕａｌｏｎｇ，Ｚｈｏｕ Ｊｉａｎｂｏ，Ｆｕ Ｌｉｘｉｎ，Ｚｈｏｕ Ｂｉｎ，Ｚｈａｎｇ Ｊｕｅ，Ｈｕａｎｇ Ｂｉａｏ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ ＮｕｃｌｅａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，ＪｉａｎｇｓｕＫｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ ＭｏｌｅｃｕｌａｒＮｕｃｌｅａｒＭｅｄｉ⁃ ｃｉｎｅ，ＪｉａｎｇｓｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｗｕｘｉ ２１４０６３，Ｃｈｉｎａ （Ｇｕｏ ＭＭ，Ｚｈｏｕ Ｂ，Ｚｈａｎｇ Ｊ，Ｈｕａｎｇ Ｂ）；Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＷｕｘｉＰｅｏｐｌｅ′ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｗｕｘｉ２１４０２３，Ｃｈｉｎａ （Ｘｉａｏ ＨＬ）；Ｄｅｐａｒｔ⁃ ｍｅｎｔ ｏｆ ＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＪｉａｎｇｙｉｎＰｅｏｐｌｅ′ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉａｎｇｙｉｎ ２１４４００，Ｃｈｉｎａ （Ｚｈｏｕ ＪＢ）；Ｗｕｘｉ Ｊｉａｎｇｙｕａｎ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｒａｄｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｗｕｘｉ２１４０６３，Ｃｈｉｎａ （ＦｕＬＸ） Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｈｕａｎｇ Ｂｉａｏ，Ｅｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｂｉａｏ＠ｊｓｉｎｍ．ｏｒｇ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａ ｔｉｍｅ⁃ｒｅｓｏｌｖｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ ｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｓｓａｙ