实验一 鸡胚接种课件.pptVIP

实验一 鸡胚接种;一、实验目的;鸡胚用于病毒培养的优缺点;（二）缺点1、胚内可能污染细菌和病毒 沙门氏菌、禽白血病病毒、新城疫、禽脑脊髓炎病毒2、母源抗体3、许多病毒在鸡胚中增殖缺乏特异性的感染指针;二、鸡胚的结构与功能;1、卵壳 上有细孔，进行气体交换2、壳膜 使气体分子和液体分子在内外两方面进行交换。3、气室 呼吸和调节压力; 4、绒毛尿囊膜 起胚胎呼吸器官的功能，氧气的交换是在膜的血管内通过卵壳孔而进行的。 ;5、尿囊腔 胚胎的排泄器官，内含有尿囊液，初为透明液体，是单纯生理盐溶液，以后尿囊液中尿酸盐迅速增加，胚胎发育到第12-13天后，尿囊液开始变得混浊。;6、羊膜与羊膜腔 其中盛有羊水，胎体浸泡于其中7、卵黄 在胚胎发育早期供给鸡胚营养。8、卵白 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。;接种途径;1、鸡胚 9-11日龄2、病毒 新城疫病毒3、照蛋灯4、打孔器5、石蜡6、注射器7、蛋座8、酒精棉球、碘酊棉球;四、鸡胚接种方法;（一）卵黄囊接种法;方法二：1）2）同一3）将卵横放在卵座上，胚胎位置向下。在卵长径的1/2处用碘酊和酒精消毒。4）用钢锥打一小孔，将针头刺入约1.5cm，注入病毒液0.1-0.5ml。5）用熔化的石蜡封孔，置孵卵箱内继续孵育，24h内死亡者废弃。;（二）绒毛尿囊膜接种;方法二：（要做人工气室）1、在胚胎附近近气室处，选择血管较少的部位，用电烙器在卵壳上烙一个直径约3-4mm的烤焦圈。2、用碘酊和酒精消毒后，小心用刀尖撬起卵壳，造成卵窗。3、在气室端中央钻一个小孔。4、用针尖挑破卵窗中心的壳膜，切勿损伤其下的绒毛尿囊膜，滴加生理盐水于刺破处。 ;5、用橡皮乳头紧贴于气室中央小孔上吸气，造成气室内负压，使卵窗部位的绒毛尿囊膜下陷而形成人工气室，此时可见滴于壳膜上的生理盐水迅速渗入。6、用1ml注射器滴2-3滴接种物于绒毛尿囊膜上。;7、用透明胶纸封住卵窗，或用玻璃纸盖于卵窗中，周围涂上熔化的石蜡密封，气室中央的小孔用石蜡密封。8、胚横卧于卵箱中，不许翻动，??持卵窗向上。 ;（三）? 尿囊腔接种 主要用于正粘V和副粘V，如流感V、新城疫V的分离和增殖。1、选用10-11日龄的鸡胚，画出气室和胚位2、在气室接近胚体处用碘酊和酒精进行消毒3、用钢锥穿一小孔4、将注射器沿小孔插入0.5-1.0cm，注入0.1-0.2ml接种物5、用石蜡封口，并置孵卵箱中孵育，每天翻卵并检卵一次，24h内死亡者废弃。;五、新城疫病毒接种鸡胚后病变;六、收毒;七、实验报告