大肠杆菌感受态的制备(CaCl2法)实验课件.ppt

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2018-11-08 发布于江苏
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实验五大肠杆菌感受态的制备（CaCl2法） 1. 实验目的 2. 实验原理 3. 实验仪器、材料与试剂 4. 实验步骤 5. 实验结果与讨论实验目的学习CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞。实验原理用于感受态细胞制备的大肠杆菌菌株一般是限制-修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株。受体细胞经过一些特殊方法（如：电击法，CaCl2等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许带有外源DNA的载体分子进入的感受态细胞。实验仪器、材料与试剂（一）仪器 1. 恒温摇床 2. 超净工作台 3. 高压灭菌锅 4. 低温离心机 5. 微量取液器（二）材料大肠杆菌DH 5α。（三）试剂 1. LB液体培养基 2. 0.1mol/L CaCl2溶液