基因工程制药-3-表达.pptVIP

3.5 目的基因表达 合成目的基因产物包括转录、翻译、加工等过程，首先使目的基因编码序列在RNA聚合酶催化下转录成mRNA，mRNA与核糖体结合，由tRNA将氨基酸引入，按mRNA的遗传信息翻译为多肽。通常，新生多肽需经过翻译后加工，如糖基化、磷酸化等才能成为有功能的蛋白。 一. 宿主细胞的选择 对宿主细胞的要求： 容易获得较高浓度的细胞，能利用价廉易得原料，不产生内毒素、不致病，需氧低，发热量低，适当的发酵温度，易进行代谢调控，易进行DNA重组技术操作，产物的产量、产率高，易进行分离纯化等。 宿主细胞有两类： 原核细胞表达体系（大肠杆菌、枯草芽孢杆 菌、链霉菌）； 真核细胞表达体系（酵母、哺乳动物细胞） 1.原核细胞表达体系 大肠杆菌(Eschertchia coli) 研究的比较多，技术成熟； 操作方便；成本低； 不存在翻译后修饰作用，对蛋白质产物不能糖基化； 枯草芽孢杆菌 分泌能力强；具有若干种有价值的信号肽序列 链霉菌 分泌能力强，安全不致病；表达的蛋白基本能正确折叠,不形成包涵体 2.真核细胞表达体系 (1)酵母表达体系 eg.乙肝，干扰素等 主要优点： ①强启动子可促使外源基因达到高效表达,如明