荧光细胞化学测定及细胞活力测定课件.pptVIP

荧光细胞化学测定及细胞活力测定课件.ppt

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* * 荧光细胞化学测定及细胞活力测定 实验目的 1.学习荧光显微镜的使用 2.了解荧光显微技术原理和方法 3.荧光技术在细胞化学方面的应用 4.学习鉴定细胞死活 实验原理 荧光显微镜是一种以短波光为光源,用以照射被检物体, 使之发出荧光, 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置的光学显微镜。 荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别 1.照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上; 2.光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜; 3.有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人眼。 实验用品 (一)材料:洋葱 (二)用品:荧光显微镜,载玻片,镊子,烧杯等。 (三)试剂: (1) O.01% 吖啶橙生理盐水溶液(亲核酸荧光活性染料,核绿质黄)   (2) O.02% 异硫氰酯荧光素生理盐水溶液(壳聚糖的标记)   (3) O.Ol% 罗丹明生理盐水溶液(一种可以通过细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料,呈黄绿色荧光)   (4) 荧光增白剂溶液,将荧光增白剂溶于0.4M山梨醇溶液中,使浓度达到0.1%。 (5) 二丙酸酯荧光素溶液:取l0mg二丙酸荧光素于5ml丙酮中,将此溶液逐滴加入5ml PH5-6生理盐水或0.65M的甘露醇溶液中,直到出现永久性乳白沉淀为止。        图片欣赏 *

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