浮游菌检测操作规程.docVIP

四川好培养生物工程有限公司 文件编号 PG-31-2015 浮游菌检测操作规程 版 本 A 修 改 次 0 目的 建立浮游菌检测操作规程，规范人员操作，保证洁净环境能达到洁净要求。 范围 本规程适用于本公司洁净室（区）中浮游菌的监测。 依据 YY0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》、GB/T16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》 职责 品管部负责洁净室（区）中浮游菌的监测。 浮游菌测试步骤 5.1测试前仪器、培养皿表面应严格消毒 5.1.1采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100及洁净室的采样器宜预先放在被测房间内。 5.1.2用消毒剂擦拭培养皿的外表面。 5.1.3采样前，先用消毒剂清洗采样器的顶盖、转盘以及罩子的内表面，采样结束，再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。 5.1.4采样口及采样管，使用前必须高温霉菌，如用消毒剂对采样管的外壁及内壁进行消毒时，应将管中残留液倒掉并晾干。 5.1.5采样人员应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒或无菌手套操作。 5.1.6采样仪器经消毒后先不放入培养皿，开启浮游菌采样器，使仪器中的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min，并检查流量并根据采样量调整设定采样时间。 5.1.7关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子。 5.1.8置采样口于采样点后，开启浮游菌采样器进行采样。 5.2培养 5.2.1全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 5.2.2采用大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)配制的培养皿经采样后，在30℃-35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20℃-25℃培养箱中培养，时间不少于5d。 5.2.3每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。 5.3菌落计数 5.3.1用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用5-10倍放大镜检查，是否遗漏。 5.3.2若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍可以2个或2个以上菌落计数。 6.测试规则 6.1测试条件 在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件，例如：这种预先测试可包括： 温度和湿度的测试，洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18℃-26℃，相对湿度在45%-65%为宜），同时应满足测试仪器的使用范围； 室内送风量或风速的测试，或压差的测试； 高效过滤器的泄漏测试。 6.2测试状态 静态和动态均可进行测试。 静态测试时，室内测试人员不得多余2人。 测试报告中应标明测试时所采用的状态和室内测试人员数。 6.3测试时间 6.3.1对于非单向流洁净室（区），测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。 6.3.2在动态测试时，则需记录生产开始的时间以及测试时间。 6.4采样点数目及其布置 6.4.1采样点数目 面积 （M2） 洁净度级别 100级 C级（10000级） D（100000级） 10 》1020 》2040 》40100 》100200 》200400 》4001000 2000 2-3 4 8 16 40 80 160 400 800 2 2 2 4 10 20 40 100 200 2 2 2 2 3 6 13 32 63 注：表中的面积，对于单向流洁净室，是指送风面积，对于非单向流洁净室，是指房间面积。 6.4.2采样点的位置 工作区测点位置离地面0.8-1.5m左右（略高于工作面）； 送风口测点位置离开送风面30cm左右； 可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。 测试点步骤件附录A 6.5最小采样量及检测标准 洁净度级别 采样量（L/次） 浮游菌数（个/m3） 100级 1000 ≤5 10000级 500 100 100000级 100 500 300000级 100 -- 每个点一般采样一次。 6.6计算 6.6.1每个测点的浮游菌平均浓度的计算： 浮游菌平均浓度（个/m3）=菌落数÷采样量 6.6.2结果评定 6.6.2.1每个测点的浮游菌平均浓度必须低于所选定评定标准中的界限。 6.6.2.2在静态测试时，若某测点的浮游菌平均浓度超过评定标准，则应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。 编制 年 月 日 批准 年 月 日